[发明专利]修饰天然SOD酶液的方法、后处理修饰的SOD酶液及肉豆蔻酸-SOD冻干粉

权利要求书

1.一种修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述天然SOD酶液修饰采用的修饰剂为肉豆蔻酰氯。

2.根据权利要求1所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述天然SOD酶液是采用以下步骤制取的：

将酶活性为6.0×10³～1.2×10⁴U/mg蛋白的天然SOD冻干粉，溶解于pH9.0，0.05mol/L的Tris-HCl缓冲液中。

3.根据权利要求2所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述天然SOD冻干粉为60～200克。

4.根据权利要求1或2所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述肉豆蔻酰氯为45～150ml，肉豆蔻酰氯浓度为95％～99％。

5.一种制备权利要求1、2或3所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述天然SOD酶液修饰是通过以下步骤完成的：

天然SOD酶液倒入带夹套的反应釜中，搅拌，加热至36～45℃并保持恒温；然后滴加肉豆蔻酰氯，同时滴加2mol/L碱溶液，使酶液的pH值始终维持在9.0左右；恒温反应1小时，其中肉豆蔻酰氯在前30分钟左右滴加完毕；碱溶液的滴加贯穿整个反应过程以维持酶液pH值的稳定；修饰反应完毕后，迅速倒出酶液并冷却至4℃，得到修饰的SOD酶液。

6.根据权利要求5所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述肉豆蔻酰氯和碱溶液滴加是连续缓慢滴加的。

7.一种制备权利要求4所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述天然SOD酶液修饰是通过以下步骤完成的：

天然SOD酶液倒入带夹套的反应釜中，搅拌，加热至36～45℃并保持恒温；然后滴加肉豆蔻酰氯，同时滴加2mol/L碱溶液，使酶液的pH值始终维持在9.0左右；恒温反应1小时，其中肉豆蔻酰氯在前30分钟左右滴加完毕；碱溶液的滴加贯穿整个反应过程以维持酶液pH值的稳定；修饰反应完毕后，迅速倒出酶液并冷却至4℃，得到修饰的SOD酶液。

8.根据权利要求7所述的修饰天然SOD酶液的方法，其特征在于：所述肉豆蔻酰氯和碱溶液滴加是连续缓慢滴加的。

9.一种后处理上述任一权利要求所述的修饰的SOD酶液的方法，其特征在于：所述后处理包括以下步骤：

修饰SOD酶液冷却后，边搅拌边加入2倍体积的冷丙酮，静置30分钟后离心，收集沉淀，用适量的纯净水溶解，再离心去除沉淀，以除去未反应的肉豆蔻酰氯，收集上清液，超滤浓缩后冷冻干燥，得到肉豆蔻酸-SOD冻干粉。

10.一种肉豆蔻酸-SOD冻干粉，其特征在于：所述肉豆蔻酸-SOD冻干粉是采用上述任一权利要求制备的。