[发明专利]光敏染料锇配合物及其制备方法、癌变早期 DNA 氧化损伤快速检测试剂盒及检测方法

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种光敏染料锇配合物及其制备方法、使用该光敏染料锇配合物进行癌变早期DNA氧化损伤快速检测的试剂盒及检测方法。 

背景技术

癌症，一旦发现大多已处于晚期，令医者回天乏术，只有早期诊断才能防患于未然。化学反应、辐射以及单线态氧、超氧自由基和羟基自由基等需氧代谢的副产物都可导致DNA的氧化损伤，产生基因突变，诱发肿瘤、机体细胞的老化和某些退行性疾病。而DNA的四个碱基中鸟嘌呤G最容易被氧化，其主要氧化产物是8-氧-7,8-二氢脱氧鸟嘌呤（8-羟基鸟嘌呤,8-oxoG），它在体内形成后较为稳定，是DNA氧化损伤的重要生物标识物，对它的监测可以反映DNA受损程度，从而对癌变进行早期预警、预防。因此，快速、专一、可靠地检测DNA中的8-oxoG方法的研究，具有十分重要的理论和现实意义。 

目前DNA中8-oxoG的常规检测方法主要有：酶联免疫分析、高效液相色谱与电化学/质谱联用、毛细管气象色谱-质谱联用、凝胶电泳等。但这些方法都不具备专一性，并且需要先对DNA进行水解、酶解、衍生化、杂交等预处理，再借助专门的技术和仪器进行检测，分析时间较长，限制了它们在常规体检及门诊化验上的推广应用。 

三联吡啶锇（Os(bpy)₃³⁺，0.63V vs Ag/AgCl）是文献报道（R.C.Holmberg,M.T.Tierney,P.A.Ropp,E.E.Berg,M.W.Grinstaff,H.H.Thorp,Inorg.Chem.2003,42,6379；V.A.Szalai,M.J.Singer,H.H.Thorp,J.Am.Chem.Soc.2002,124,1625；P.A.Ropp,H.H.Thorp,Chem.Biol.1999,6,599；A.Mugweru,B.Wang,J.Rusling,Anal.Chem.2004,76,5557；L.Dennany,R.J.Forster,B.White,M.Smyth,J.F.Rusling,J.Am.Chem.Soc.2002,124,1625）中唯一可以专一氧化8-oxoG（0.5±0.1V vs Ag/AgCl）的化学试剂，目前它已在8-oxoG的电化学检测中得到了很好的应用，其原理如下所示。 

但该电化学检测方法需要先通过化学键将Os(bpy)₃²⁺探针分子接植到DNA链段的5’端，或者将探针分子和DNA层层相间地均匀涂敷到电极表面制成薄膜，重复包涂直到膜的均匀度和厚度达到要求为止，操作相当繁琐，不适合常规检测。 

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种癌变早期DNA氧化损伤快速检测试剂盒及检测方法，用于癌变早期的特异预警、预防。此外，本发明的另一个目的是提供一种新型的光敏染料锇配合物及其制备方法。 

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 

1.一种光敏染料锇配合物，其特征在于，该光敏染料锇配合物具有下列结构通式Ⅰ： 

LL’L’’Os-Y₄                （Ⅰ） 

通式Ⅰ中，Y为卤素离子、ClO₄^-、BF₄^-、PF₆^-或OTs^-，L、L’各自独立地选自以下配体： 

其中，R₁和R₂各自独立地选自H、C_1-10烷基、CHO、COOH、NH₂、NO₂、CN、OH、SH、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、C_1-6酰胺基、C_1-6卤代烷基、具有C_1-10烷基的吩噻嗪基或卤素， 

L’’为以下配体：