[发明专利]胞内分枝杆菌检测用引物和探针、以及使用该引物和探针检测胞内分枝杆菌的方法

权利要求书

1.一种寡核苷酸，其由序列号1～5、7～15的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号1～5、7～15的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成，且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交。

2.一种胞内分枝杆菌检测用引物，其含有下述寡核苷酸，所述寡核苷酸由序列号16～39、48～91的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号16～39、48～91的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成，且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交。

3.根据权利要求2所述的引物，其经标记物质标记。

4.根据权利要求3所述的引物，其中，标记物质是选自放射性同位素、酶、荧光物质、化学发光物质或生物素中的物质。

5.一种胞内分枝杆菌检测用探针，其含有下述寡核苷酸，所述寡核苷酸由序列号1～5、7～39、48～103、108～129的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号1～5、7～39、48～103、108～129的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成，且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交。

6.根据权利要求5所述的探针，其经标记物质标记。

7.根据权利要求6所述的探针，其中，标记物质是选自放射性同位素、酶、荧光物质、发光物质或生物素的物质。

8.根据权利要求5所述的探针，其5’末端被报告荧光色素标记，3’末端被猝灭色素标记。

9.一种胞内分枝杆菌检测用试剂盒，所述试剂盒包含作为引物的寡核苷酸和/或作为探针的寡核苷酸，其中，

作为引物的寡核苷酸由序列号16～39、48～91的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号16～39、48～91的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成，且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交，

作为探针的寡核苷酸由序列号1～5、7～39、48～103、108～129的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号1～5、7～39、48～103、108～129的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成，且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交。

10.由序列号1～5、7～15的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号1～5、7～15的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成、且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交的寡核苷酸的用途，用于设计胞内分枝杆菌检测用引物或探针。

11.由序列号16～39、48～91的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号16～39、48～91的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成、且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交的寡核苷酸引物的用途，用于检测胞内分枝杆菌。

12.根据权利要求11所述的用途，其中，使用该引物，以样品中的核酸为模板进行核酸扩增反应，检测所得的引物延伸产物。

13.根据权利要求12所述的用途，其中，还使用经标记物质标记的标记探针。

14.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，包含下述工序：

(1)使用该引物，以样品中的核酸为模板进行核酸扩增反应；

(2)对(1)所得的引物延伸产物进行电泳，基于其结果来判定有无胞内分枝杆菌。

15.根据权利要求11所述的用途，其中，引物经标记物质标记，使用该引物以样品中的核酸为模板进行聚合酶链反应，测定所得的引物延伸产物的标记。

16.由序列号1～5、7～39、48～103、108～129的任一者所示碱基序列构成、或者由序列号1～5、7～39、48～103、108～129的任一者所示碱基序列的完全互补序列构成、且与胞内分枝杆菌基因的碱基序列杂交的寡核苷酸探针的用途，用于检测胞内分枝杆菌。

17.根据权利要求16所述的用途，使将该探针用标记物质进行标记而得的标记探针与样品中的核酸杂交，除去游离的标记探针，然后检测杂交所得的复合体的标记。