[发明专利]用于肿瘤病理诊断的试剂盒及对组织切片进行染色的方法

权利要求书

1.一种用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，包括用于肿瘤病理诊断的探针；所述探针包括金纳米簇、肿瘤特异性标志物的抗体及考马斯亮蓝，所述金纳米簇与所述肿瘤特异性标志物的抗体通过点击化学方式连接，所述考马斯亮蓝与所述连接有所述肿瘤特异性标志物的抗体的金纳米簇通过静电方式结合；其中，所述金纳米簇、所述肿瘤特异性标志物的抗体及所述考马斯亮蓝的摩尔比为1～10:1～100:1～100。

2.根据权利要求1所述的用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，所述点击化学方式连接为所述金纳米簇表面修饰的叠氮基与所述肿瘤特异性标志物的抗体表面修饰的炔基发生点击化学反应而连接。

3.根据权利要求1所述的用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，所述金纳米簇的粒径为0.5～2nm。

4.根据权利要求1所述的用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，所述肿瘤特异性标志物的抗体为乳腺癌的抗HER2蛋白抗体、乳腺癌的抗P53蛋白抗体、乳腺癌的抗p185蛋白抗体、肺癌的CEA单克隆抗体或抗人肺癌单克隆抗体(McAb)N-35。

5.根据权利要求1所述的用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括封闭剂、过氧化氢及核染剂。

6.根据权利要求5所述的用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，所述封闭剂为正常的山羊血清、牛血清白蛋白或牛奶粉。

7.根据权利要求5所述的用于肿瘤病理诊断的试剂盒，其特征在于，所述核染剂为DAPI或Hoechst。

8.一种使用如权利要求5所述的试剂盒对组织切片进行染色的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将冰冻组织切片或预先经脱蜡水化处理后的石蜡组织切片依次浸泡于无水乙醇、质量分数为95%的乙醇溶液以及质量分数为70%的乙醇溶液中，每次5分钟，然后用PBS洗涤；

在组织切片上滴加体积分数为3%的过氧化氢溶液，室温静置10分钟，并经PBS洗涤；

将组织切片放入至95℃枸橼酸钠缓冲溶液中恒温浸泡10～15分钟，并经PBS洗涤，其中，枸橼酸钠缓冲溶液的浓度为0.01mol/L；

在组织切片上滴加封闭剂，于室温下封闭20分钟后，甩去多余液体；

在组织切片上滴加所述用于肿瘤病理诊断的探针，室温下静置1小时、4℃过夜或者37℃下静置1小时，并经PBS洗涤，其中，所述探针的终浓度为0.01～10mmol/L；

在组织切片上滴加核染剂，然后于37℃下孵育7～10分钟，使核染剂的终浓度为0.1～10μg/ml，并经PBS或自来水洗涤；

封片，然后镜检。