[发明专利]一种检测过氧化氢、尿酸或尿酸酶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及电分析化学技术领域，尤其涉及一种检测过氧化氢、尿酸或尿酸酶的方法。

背景技术

尿酸是人体中嘌呤类化合物分解代谢的主要产物，人体中尿酸含量的变化可以反映出与临床中许多心血管和代谢类等相关的疾病。尿酸含量的测定是诊断许多疾病如痛风、高血压，肾病等的一个重要依据。常规的检测尿酸的方法如酶光度法，化学发光法等，而这些方法灵敏度低、操作过于繁琐且成本比较高等，因此建立一种简单快速的方法来检测尿酸的浓度，对临床中相关疾病的预防、诊断以及监控有着重要的意义。

为了适应临床上检测尿酸简单、快速和准确的要求，现代医学上一般是采用尿酸酶法测定尿酸的含量。现有技术公开了许多报道利用间接氧化酶法就是酶促反应产生H₂O₂，通过检测H₂O₂的浓度间接的检测尿酸的浓度。现有技术公开的技术方案都是通过构建检测灵敏度高的修饰电极，利用该修饰电极作为工作电极实现对尿酸的灵敏检测。如层层自组装的方法在电极上组装上一层或几层分子膜，然后，使用共价连接的方式将尿酸酶与微过氧化物酶组装在电极表面，通过还原过氧化氢的方法检测尿酸（Biosens.Bioelectron.2007,23:556～561.)。再如现有技术公开了一种DNA/聚氨基苯磺酸双层膜修饰玻碳电极检测尿酸的技术方案，其通过电沉积的方法在玻碳电极表面构建了一种DNA/聚氨基苯磺酸复合层，聚氨基苯磺酸在电极表面形成了二维不规则纳米结构，DNA被沉积在聚氨基苯磺酸的表面，该修饰电极为多巴胺、尿酸和抗坏血酸的氧化提供一个超电活性的表面，实现了对多巴胺、尿酸和抗坏血酸的检测。

然而这种构建修饰电极的方法成本较高且制作电极的过程太复杂，对尿酸的检测结果准确度仍然较低。

发明内容

本发明提供了一种检测尿酸、尿酸酶或过氧化氢的方法，本发明提供的方法具有选择性好、灵敏度高和检测简便的优点。

本发明提供了一种检测尿酸的方法，包括以下步骤：

a）将待测溶液与芳基硼化物和尿酸酶混合进行反应，得到含有酚类化合物的中间待测溶液，所述待测溶液包含尿酸；

b）采用电化学方法检测含有酚类化合物的中间待测溶液，得到所述酚类化合物的电化学响应信号；

c）根据所述酚类化合物的电化学响应信号与预定的尿酸标准曲线，得到待测溶液中尿酸的含量。

本发明提供了一种检测尿酸酶的方法，包括以下步骤：

a）将待测溶液与芳基硼化物和尿酸混合进行反应，得到含有酚类化合物的中间待测溶液，所述待测溶液包括尿酸酶；

b）采用电化学方法检测含有酚类化合物的中间待测溶液，得到所述酚类化合物的电化学响应信号；

c）根据所述酚类化合物的电化学响应信号与预定的尿酸酶标准曲线，得到待测溶液中尿酸酶的含量。

本发明提供了一种检测过氧化氢的方法，包括以下步骤：

a）将待测溶液与芳基硼化物进行反应，得到含有酚类化合物的中间待测溶液，所述待测溶液包括过氧化氢；

b）采用电化学方法检测含有酚类化合物的中间待测溶液，得到所述酚类化合物的电化学响应信号；

c）根据所述酚类化合物的电化学响应信号与预定的过氧化氢标准曲线，得到待测溶液中过氧化氢的含量。

优选的，所述芳基硼化物为对羟基苯硼酸和对氨基苯硼酸中的一种或两种。

优选的，所述步骤a）中反应的pH值为6.5～9.5。

优选的，所述步骤a）中反应的时间为30s～5min。

优选的，所述步骤a）中尿酸的物质的量、芳基硼化物的物质的量与尿酸酶的活力单位比为1mmol:（0.5～600）μmol:（1～150）U。

优选的，所述步骤a）中过氧化氢与芳基硼化物的摩尔比为（1～20）:1。

优选的，所述步骤b）中的电化学方法为循环伏安法；

所述循环伏安法的扫描速率为30mV/s～60mV/s。

优选的，所述步骤b）中电化学方法的三电极系统为：

高向热解石墨电极为工作电极；

铂丝为辅助电极；

Ag/AgCl（饱和KCl溶液）为参比电极。