[发明专利]胚胎干细胞特异性标志物Aire及其应用

权利要求书

1.胚胎干细胞特异性标志物Aire，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

2.胚胎干细胞特异性标志物Aire，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

3.胚胎干细胞特异性标志物Aire在鉴定胚胎干细胞中的应用，其特征在于，用Aire单克隆抗体或Aire多克隆抗体通过检测抗原抗体相互作用来鉴定胚胎干细胞。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述Aire多克隆抗体的制备方法为：分别合成由SEQ ID No.1所示的Aire序列C末端的21个氨基酸组成的多肽以及由SEQ ID No.2所示的Aire序列C末端的12个氨基酸组成的多肽；分别将多肽偶联载体蛋白KLH，即为完全抗原；将完全抗原与完全弗氏佐剂混合，免疫新西兰大白兔；首免后，每隔两周加强免疫；四免后取全血，分离兔血清中的Aire兔多克隆抗体。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，检测抗原抗体相互作用的方法为免疫细胞化学法ICC、IHC染色、流式细胞术或免疫共沉淀。

6.胚胎干细胞特异性标志物Aire在鉴定胚胎干细胞中的应用，其特征在于，通过检测细胞中Aire基因的表达量来鉴定胚胎干细胞。

7.一种鉴定胚胎干细胞的方法，其特征在于，任选以Aire、Glut3和GM-CSFRα中的至少一种作为鉴定胚胎干细胞的标志物。

8.胚胎干细胞检测试剂盒，其特征在于，任选包含Aire多克隆抗体、Glut3单克隆抗体和GM-CSFRα单克隆抗体中的至少一种。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述Glut3单克隆抗体和GM-CSFRα单克隆抗体分别由杂交瘤细胞株ZJUESRMAB39和ZJUESRMAB29产生，保藏号分别为CGMCC NO.7301和CGMCC NO.7302。

10.Aire多克隆抗体在胚胎干细胞检测中的应用，其特征在于，所述Aire多克隆抗体的制备方法为：分别合成由SEQ ID No.1所示的Aire序列C末端的21个氨基酸组成的多肽以及由SEQ ID No.2所示的Aire序列C末端的12个氨基酸组成的多肽；分别将多肽偶联载体蛋白KLH，即为完全抗原；将完全抗原与完全弗氏佐剂混合，免疫新西兰大白兔；首免后，每隔两周加强免疫；四免后取全血，分离兔血清中的Aire兔多克隆抗体。