[发明专利]水稻转录因子Os01g64730基因的应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地说，涉及水稻转录因子Os01g64730基因的应用。

背景技术

在长日照植物（LDP）拟南芥(Baurle and Dean,2006;Imaizumi and Kay,2006)和短日照植物（SDP）水稻(Izawa,2007;Tuji等,2008)中，开花信号途径已得到了广泛的研究。GI-CO-FT是控制水稻开花的保守途径(Yano等,2000;Kojima等,2002;Hayama等,2002)。Hd3a是水稻中FT的同源基因，它受到一个B型响应调控子Ehd1的诱导，该途径在短日照条件下独立于Hd1基因(Doi等,2004)。OsMADS51受OsGI的调控，该作用位于Ehd1的上游(Kim等,2007)。相反，在长日照条件下，Hd1抑制Hd3a的表达而推迟水稻开花(Hayama等,2003)。最新研究表明，Hd3a与14-3-3蛋白形成复合体后转入细胞核内，与转录因子FD1结合形成三聚体FAC(florigen activation complex)，诱导OsMADS15的转录，从而使水稻开花。

转录因子在体内的作用大体上可以分成两种：一种为转录增强子，另一种为转录抑制子。当转录因子和EAR功能域基序融合之后，它就会抑制转录因子的功能，从而在转基因植株中出现更明显的表型变化。

发明内容

本发明的目的是提供水稻转录因子Os01g64730基因的应用。

为了实现本发明目的，本发明首先提供一种融合蛋白，该融合蛋白为Os01g64730-Linker-EAR或EAR-Linker-Os01g64730。其中，Linker由1～20个柔性氨基酸串联而成（例如，GGGGG、GPPPG或Gatway载体重组位点编码的氨基酸序列DPAFLYKVVPR等）。

EAR为来自植物转录因子的一段具有转录抑制功能的蛋白基序，其氨基酸序列如Seq ID No.2所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列，

Os01g64730为水稻转录因子Os01g64730，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。

优选地，前述融合蛋白为Os01g64730-Linker-EAR。

本发明还提供编码所述融合蛋白的基因，以及在严格条件下，可与该基因的核苷酸序列杂交的核苷酸序列；其中，所述严格条件为65℃，在0.1×SSPE或0.1×SSC、0.1%SDS的溶液中杂交并洗膜。

本发明还提供含有编码所述融合蛋白的基因的载体。所述载体为任一种可引导外源基因在宿主中表达的载体。优选地，所述载体为植物双元表达载体（例如，pCAMBIA1301）。在将本发明编码所述融合蛋白的基因构建到植物表达载体中时，可在其转录起始核苷酸前添加任一种强启动子（例如，玉米强启动子Ubiquitin）或诱导型启动子。此外，在将本发明编码所述融合蛋白的基因构建到植物表达载体中时，还可以使用增强子，且这些增强子区域必须与编码序列的阅读框相同，以确保整条序列的翻译。

本发明还提供含有编码所述融合蛋白的基因的转基因细胞系。

本发明还提供含有编码所述融合蛋白的基因的工程菌。

本发明还提供编码所述融合蛋白的基因在使水稻抽穗提前、缩短生育期中的应用。

本发明进一步提供水稻转录因子Os01g64730基因的应用，其是将水稻转录因子Os01g64730基因的CDS序列（完整翻译区）构建到转录因子抑制基序EAR的上游，转化水稻，筛选并最终获得转基因水稻。

前述的应用，其是将水稻转录因子Os01g64730基因的CDS序列通过Gateway系统构建到转录因子抑制基序EAR的上游，转化水稻（如水稻品种‘kitaake’），从而使转基因水稻的抽穗期提前、缩短生育期。其中，水稻转录因子Os01g64730基因的CDS序列如Seq ID No.3所示，转录因子抑制基序EAR的核苷酸序列如Seq ID No.4所示。