[发明专利]一种测试抗菌药物对病原微生物敏感性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物药敏测试方法，具体地说，涉及一种测试抗菌药物对病原微生物敏感性的方法，属于药物领域。

背景技术

随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度。

尽管新型抗菌药物不断出现，但常见感染菌的耐药性也随之增加。国内耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）及血浆凝固酶阴性的葡萄球菌的检出率在20%-80%之间，耐万古霉素的肠球菌（VRE）,具有超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科，耐青霉素的肺炎链球菌的检出率也在增多。因此，有效而合理的抗菌药物治疗更加依赖准备及时的抗菌药敏试验。

体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A组抗菌药物）或临床使用的主要抗菌药物（B组抗菌药物）进行药敏试验。

根据美国临床实验室标准化委员会的规定，检测细菌对抗菌药物的敏感性，抗菌药物分了几组，A、B、C、U，还有O组等。

A组药主要是针对的抗菌药物，要首选，而且是常规报告。对于B组的抗菌药物要进行首选试验，但是选择性报告。所谓选择性报告就是当A组的同类药物耐药，或者是病人对这种药物过敏，或者是临床治疗无效的时候，就应该用B组的药物，所以我们要选择性报告B组药物。还有一种情况就是对特定部位的标本进行B组药物的报告，这种特定部分的标本主要是脑脊液当中的肠杆菌，对三代头孢菌素的敏感性，泌尿道的一些分离的菌株，它们对复方磺胺的敏感性。再就是多种细菌感染或者是多部位感染的时候应该选择性的报道一些B组的药物。

C组的药物主要是指的替代或者是补充性的，不作常规报告也是选择性的报告，选择C组药物报告主要是在一些基本药物过敏或者是这些菌株容易造成局部或者是广泛流行的这些菌株。还有就是治疗少见菌的感染，比如肠道用分离的沙门菌检测它们对氯霉素的敏感性。

U组的药属于泌尿道感染药物，像呋喃妥因，或者是喹诺酮类的药物，主要用在泌尿道感染。

用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗菌药物浓度梯度法（E-test法），和自动化仪器等。

纸片扩散法是我们现在实验室最常用的一种方法，因为它经济、实用、简便，这是一种定性的试验，通过邻近纸片之间抑菌圈的形态变化我们可以观察抗菌药物之间的相互作用。

浓度梯度法需要采取E-test试条，试条的成本比较高，但是这种方法操作比较简单，结果判定也是比较清楚的，是一种定量的方法。

微量液体稀释法是把抗菌药物加到了微孔板当中，进行了不同的稀释，所以操作比较繁琐，在孔里面生长的细菌我们看不出来是不是有污染菌，因此要判定它是不是有污染菌必须再转种到平板上进行判定，这是一种定量的方法，可以直接给出最低抑菌浓度。

琼脂稀释法是把抗菌药物加到了菌制板里，然后把细菌再接种到平板上，这种方法适合大批量细菌进行药敏检测，能够进行定量检测。

现在越来越多的实验室引进了先进的自动化的仪器，如VTTEK、MicroScan和Phoenix，都是可以进行细菌药敏试验的。它们最大的优点就是可重复，检测时间比较快，避免了手工量读的错误，而且还带有专家分析系统。当然仪器方法也离不开人工要提前制备细菌菌悬液，菌悬液制备的纯度和浓度会影响仪器的结果，由于仪器是需要配套的抗菌药物板，因此它的耗材比较贵，抗菌药物组合是由厂家规定的不能由用户随意更改。对于临床相关的一些苛养的细菌，还有厌氧菌，部分非发酵菌仪器方法是不能测定的。对一些特殊耐药机制或者是低水平耐药的细菌，用仪器方法也不能够检测出来。国内多数的医院还是在使用纸片扩散法。

发明内容

本发明可提高微生物药敏测试的操作效率、准确性和经济性。可以定量，并且省去了稀释法的繁琐操作，比E-test试条更准确经济。