[发明专利]转基因大豆品系MON89788的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法无效
申请号: | 201310157410.2 | 申请日: | 2013-04-29 |
公开(公告)号: | CN103436598A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 胡松楠;邝筱珊;冯家望;唐食明;王小玉;游淑珠;成晓维 | 申请(专利权)人: | 胡松楠;邝筱珊;冯家望 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 广东秉德律师事务所 44291 | 代理人: | 杨焕军;田学东 |
地址: | 519015 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 大豆 品系 mon89788 lamp 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
1.转基因大豆品系MON89788的LAMP检测引物组,其特征在于,包括下列引物:
外引物F3:TGCGCATCTATCGTGGAT;
外引物B3:TGCATGTGCAGGTTCAGT;
内引物FIP:
TGATGCTAGTTATCGCGGCCGCGGGTATCGTCATTCAGTTCC;
内引物BIP:
CAGGTCCTGCACGTGTGGATTGGAGTCTCAGTTCCCAGT。
2.转基因大豆品系MON89788的LAMP检测试剂盒,其特征在于,包括以下成分:
;其中,
外引物F3:TGCGCATCTATCGTGGAT;
外引物B3:TGCATGTGCAGGTTCAGT;
内引物FIP:
TGATGCTAGTTATCGCGGCCGCGGGTATCGTCATTCAGTTCC;
内引物BIP:
CAGGTCCTGCACGTGTGGATTGGAGTCTCAGTTCCCAGT。
3.根据权利要求2所述的转基因大豆品系MON89788的LAMP检测试剂盒,其特征在于,还包括显色剂。
4.根据权利要求3所述的转基因大豆品系MON89788的LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述显色剂为荧光染料SYBR Green I。
5.根据权利要求2所述的转基因大豆品系MON89788的LAMP检测试剂盒,其特征在于,还包括对照物:阳性对照为纯度为100%、DNA浓度为100ng/ul的转基因大豆品系MON89788的标准DNA溶液,阴性对照为ddH2O。
6.转基因大豆品系MON89788的LAMP检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(101)对待检样品提取待检模板DNA;
(102)进行环介导等温基因扩增反应:
(102)进行环介导等温基因扩增反应:
配置LAMP反应体系,每25μL体积的LAMP反应体系具体为:
,将LAMP反应体系置于LAMP浊度仪中进行63℃恒温反应60min,然后在80℃下保温5min;其中,
外引物F3:TGCGCATCTATCGTGGAT;
外引物B3:TGCATGTGCAGGTTCAGT;
内引物FIP:
TGATGCTAGTTATCGCGGCCGCGGGTATCGTCATTCAGTTCC;
内引物BIP:
CAGGTCCTGCACGTGTGGATTGGAGTCTCAGTTCCCAGT。
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