[发明专利]一种芦蒿秸秆提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明专利涉及功能性食品和植物化学领域，天然活性因子的分离制备及其在功能性食品和保健品中的应用。

背景技术

晚期糖基化终产物（Advance glycation end products,AGEs）是在非酶促条件下，蛋白质、氨基酸、脂质类或核酸等的游离氨基与还原糖的醛基经过缩合、重排、裂解、氧化修饰后产生的一组稳定的终产物。而人体内脂质过氧化、糖酵解以及酶反应所产生丙酮醛（MGO）和二乙醛（GO）等这类活性二羰基化合物能够与蛋白质的氨基快速发生反应形成AGEs。在正常情况下，体内AGEs维持在一个较为平衡的状态，但当来自内源性体内生成过多或者外源性摄入AGEs含量过多的食品，会产生一系列病理生理改变。研究证明，体内器官、组织和血浆中AGEs的形成和蓄积直接引发心脑血管病变、糖尿病并发症（糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病心肌病等的微血管病变）以及老年痴呆等慢性病症。其致病机制主要包括两方面，其一为葡萄糖等糖类物质直接与蛋白质和脂质交联，破坏蛋白甚至组织的结构和功能。例如，脂蛋白糖基化后结构发生改变可产生免疫原性，血管壁上的LDL作为潜在抗原可形成原位免疫复合物，从而导致炎症反应，致动脉硬化。脂蛋白糖基化后还可导致清除障碍，血脂增高，损伤血管结构和功能。其二为AGEs与其细胞表面特异性受体(RAGEs)结合，激活一系列信号通路，增加炎症因子等的表达，最终改变组织细胞的功能，甚至产生对组织破坏。目前常见的AGEs抑制剂类糖尿病药物，如：氨基胍，甲福明二甲双胍和吡哆胺等均通过捕获MGO而达到抑制AGEs形成的效果。但长期服用化学药物会有一定的毒副作用，因此筛分天然AGEs抑制剂具有重要的现实意义。

芦蒿，又名蒌蒿、水蒿、柳叶蒿、驴蒿、藜蒿，多年生草本植物。根性凉、味甘，叶性平、味甘，有利膈、开胃行水，治胃气虚弱、浮肿及河豚中毒等病症以及预防牙病、喉病和便秘等功效。其药用价值，早在唐代的医学家孙思邈在《千金食治》中就指出：藜蒿“养五脏，补中益气，长毛发。久食不死，白兔食之仙”。《神农本草经》把其列为“上品，甘、平，无毒，长毛发令黑，疗心悬，少食常饥，久服轻身，耳目聪明，防衰之功效”。《本草纲目》记为“主治五脏邪气，风寒湿脾，补中气，利隔开胃，可去东河豚毒”。现代研究文献关于芦蒿提取物报道多为芦蒿茎或芦蒿叶的粗提物，或者选用不同种层析担体，通过多次反复柱层析鉴定所得单体化合物的功能活性，包括抗氧化，抗肿瘤，抑菌，以及保护肝脏的功能等。而芦蒿秸秆抑制蛋白糖基化活性及其提取工艺尚未见报道。

芦蒿的相关研究报道如下：

2000年，辛欣研究了藜蒿中三萜类化合物，并鉴定了齐墩果酸，进而研究了芦蒿根、茎、叶三萜提取物对醋氨酚（AAP）诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。

2004年，张健从萎蒿叶醇提物中分离得到12个黄酮类化合物。分别为芦丁、雷杜辛黄酮醇、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、阿亚黄素、木犀草素-4′,7-二甲醚、柯伊利素、芹菜素、木犀草素、3′,4′,5,7-四羟基二氢黄酮、山奈酚、槲皮素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。并研究了部分单体对肝脏微粒脂质过氧化的抑制作用。

2005年，颜流水测定芦蒿茎中绿原酸含量，发现藜蒿茎中绿原酸约占干重的1.33%。

2007年，赵呈雷研究了芦蒿秸秆水提物，70％乙醇提取物95％乙醇提取物，以及芦蒿秸秆水提不同溶剂萃取部位，母液部位，乙酸乙酯部位，正丁醇部位，石油醚部位的油脂抗氧化及抗过氧化脂质的活性。

2007年，王伟优化了大孔树脂D101纯化芦蒿提取物的工艺条件，将芦蒿提取物的总黄酮含量提高到了78.7%。

2007年，付斌采用乙醇硫酸水溶液回流提取藜蒿中的生物碱，测得芦蒿总生物碱含量的质量分数为1.9%，并研究了其对乙型肝炎病毒的抑制作用。

2009年，邹峥嵘等采用有机溶剂提取，萃取以及柱层析方法对鄱阳湖野生芦蒿进行分离与纯化研究，分离鉴定出了5个化合物，分别为5-羟基-7,4′-二甲氧基二氢黄酮，胡萝卜苷，β-谷甾醇，5,4′-二羟基-7-甲氧基二氢黄酮，5,3,4′-三羟基-7-甲氧基黄酮。

其中，对芦蒿挥发性组分的分析报道如下：

2004年陈新等采用GC和GC/MS方法对蒌蒿挥发油进行了定性定量分析，鉴定出38种化合物（占挥发油总量的99.44%）。

2006年，赵呈雷等采用气相色谱-质谱联用技术从芦蒿秸秆挥发油中共分离出45个峰，确定了其中的37种化合物。