[发明专利]人源脂肪干细胞来源的神经元样细胞及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201310161558.3 | 申请日： | 2013-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN104130975B | 公开（公告）日： | 2018-07-17 |
| 发明（设计）人： | 徐俊;高山峨 | 申请（专利权）人： | 上海市东方医院 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/0793;A61K35/12;A61P25/00;A61P25/28;A61P25/16;A61P25/14 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 崔佳佳;刘真真 |
| 地址： | 200120 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 神经元样细胞 脂肪干细胞 人源 制备 成熟 治疗神经退行性疾病 神经损伤性疾病 制备方法和应用 神经营养因子 神经元标记 离子通道 可观察 抑制剂 孵育 可用 突触 诱导 分化 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备高度成熟的人源脂肪干细胞来源的神经元样细胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1) 诱导人源脂肪干细胞向神经元样细胞分化；和
2) 利用神经营养因子促进1)所得的神经元样细胞成熟；
其中，所述神经营养因子是BDNF、NGF和NT3的组合；
在1) 诱导人源脂肪干细胞向神经元样细胞分化之前，首先利用wnt通路抑制剂DKK1对人源脂肪干细胞作预孵育24小时，
然后，利用混合培养基培养人源脂肪干细胞3天，
接下来，利用神经营养因子BDNF、NGF和NT3的组合促进所得的神经元样细胞成熟3天；
所述方法制得的人源脂肪干细胞来源的神经元样细胞群具有下述特征：
(1) 有60%以上的细胞表达神经元标记物；
(2) 有50%以上的细胞可观察到复杂的突触结构；
(3) 有40%以上的细胞表达离子通道蛋白，具备神经电生理特性。
2.采用权利要求1所述方法制备的一种人源脂肪干细胞来源的神经元样细胞群，其特征在于，所述细胞群具有下述特征：
(1) 有60%以上的细胞表达神经元标记物；
(2) 有50%以上的细胞可观察到复杂的突触结构；
(3) 有40%以上的细胞表达离子通道蛋白，具备神经电生理特性。
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