[发明专利]一种丹参注射液的基于组分结构的质量控制检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药复方制剂的质量控制标准，尤其是一种用于丹参注射液的基于组分结构的质量控制检测方法领域。

背景技术

中药制剂的药效物质基础是由多个组分按照一定的构成比组成的具有整体特征的成分群。现代药理学和植物化学研究结果表明，中药制剂发挥药效的物质基础非某单一成分起作用，而是通过多靶点、多成分实现协同作用。目前，研究人员逐渐意识到中药制剂物质基础研究及质量控制不能走传统的寻求单体的植化途径，以某活性成分或毒性成分的含量制定质量标准，而是要基于中药的整体观，以“组分”为切入点，阐明中药的物质基础并最终达到符合整体特点的中药质量控制的目的。中药物质基础“组分结构理论”认为中药制剂物质基础是一个有序的整体，具有“三个层次多维结构”，是由多种组分组成，而每一组分内也由多个的成分一定配比构成，组分间与组分内都存在一定的结构特征，这与目前以某指标含量高低来控制中药制剂质量的方法相比，既实现了可控性，又体现了中药的整体性。

丹参注射液为临床常用的中药制剂，具有活血化瘀、理气开窍、扩张血管和增进冠状动脉血流量的作用，用于心绞痛、心肌梗死等疾病的预防和治疗。丹参注射液主要含有水溶性丹参酚酸类化合物和糖类，如丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、去丹参素丹酚酸E1、去丹参素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸等。研究显示，这些化合物都具有一定的心脑血管保护作用。

发明内容

发明目的：

本发明是要依据中医药整体性和系统性的特点，解决丹参注射液的质量控制的现有不足，提供一种代表组分特征的多维结构质量控制方法。

技术方案：

一种丹参注射液的基于组分的质量控制检测方法，该方法的特征为对丹参注射液中酚酸和糖类组分的组分间组成结构和组分内结构进行控制，采用HPLC指纹图谱、柱前衍生化HPLC及NMR技术测定代表整体性的有限成分，从而整体并系统性地控制丹参注射液组分及成分内成分之间的含量比例。衡量丹参注射液质量的最佳标准为：

酚酸组分：糖类组分的含量控制范围为(1%-95%):(90%-1%)；并且丹参酚酸内丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、去丹参素丹酚酸E1、去丹参素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的构成比分别为(1%-95%):(5%-95%):(1%-20%):(1%-20%):(5%-20%):(1%-50%):(5%-20%):(1%-10%):(1%-20%):(1%-20%)；酚酸组分和糖类组分的含量总和大于总固形物的35-90%；酚酸组分的含量不低于总固形物的40-80%。

有益效果：

中药制剂产品是由众多化学成分通过协同作用发挥效应。中药制剂产品的药效物质基础是由多组分或多成分构成的某一组分组成，各组分之间的生物活性存在显著差异，作用靶点及机制也不尽相同；组分内各化合物结构也存在着差异，生物活性也存在着差异，因此，这些组分及成分发挥最佳药效的物质基础构成存在着一定的独特性，即组分之间或组分内化合物之间存在着独特的组成结构特征。丹参注射液主要包括酚酸和糖类组分，这些组分具有一定的保护心血管作用，研究显示丹参酚酸具有神经和脑缺血保护、保护心肌损伤、抗血栓和抑制血小板活化、改善糖尿病血管并发症、抑制血管细胞的增殖等作用。糖类也是其功效的物质基础构成组分之一，丹参糖类具有抗氧化活性和提高小鼠耐缺氧能力，还可通过上调prohibitin蛋白表达发挥保护H₂O₂致心肌细胞损伤的作用。因此，对丹参注射液的质量控制，不能仅以丹参素或原儿茶醛来代替整体活性成分。重要的是，构成药效物质基础的组成结构特征被忽略。因此，基于组分结构理论，阐明丹参注射液的酚酸和糖类组分间及组分内的结构特征，将实现对丹参注射液质量的真正控制，保证其疗效和安全性。本发明克服了现有的对丹参注射液产品质量控制检测方法的不足，可能成为一种丹参注射液的质量控制检测新方法。

附图说明

图1丹参注射液多维结构质量控制示意图

图2丹参注射液中酚酸类成分指纹图谱，(其中1.5-羟甲基糠醛；2.丹参素钠;3.原儿茶醛;4.咖啡酸;5.去丹参素丹酚酸E1;6.去丹参素丹酚酸E2;7.丹酚酸D;8.迷迭香酸;9.丹酚酸B;10.丹酚酸A；11,丹酚酸C)

图3 250ml:16g规格丹参注射液酚酸成分HPLC指纹图谱

图4 250ml:12g规格丹参注射液酚酸成分HPLC指纹图谱

图5丹参注射液糖类水解HPLC图（1.甘露糖2.葡萄糖3.半乳糖)