[发明专利]半胱氨酸蛋白酶抑制剂S与糖类抗原19-9的联合应用

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，涉及半胱氨酸蛋白酶抑制剂S与糖类抗原19-9的联合应用。

背景技术

近年来，由于生活水平提高，我国大肠癌发病率急剧上升，达到4.2%。我国大肠癌高发年龄普遍在50岁-60岁，比西方国家平均提早10岁。目前，大肠癌的诊断主要通过大便隐血实验、血液CA199指标、肠镜筛查等，其中大便隐血实验不易被民众接受，其检测筛选检查率低于5%；而肠镜筛查为侵入性，检测痛苦，有出血、穿孔等风险，发现问题进一步进行肠镜检查比例更低，低于3%；血液CA199指标准确度不高。通过早期发现大肠癌，然后进行早期干预大肠癌预后五年生存率高于90%。因此，如何更早期发现、及时干预，如何实现疗效评估和监测，如何对术后患者进行复发监控，是诊断和监控大肠癌亟待解决的问题。

胰腺癌是高致死率肿瘤之一，死亡率与发病率之比为0.99:1。1991-2000年全国疾病监测点系统的资料显示胰腺癌死亡率不断上升，居恶性肿瘤的第7位。65-84岁年龄段者的死亡率是15-54岁年龄段的5倍，城市死亡率为农村的2.42-4.68倍，东北和东部地区死亡率明显高于其它地区。常规的确诊手段为内窥镜逆行胰胆管造影(ERCP)、经皮肝穿刺肝胆管造影（PTC）、超声内窥检查（EUS）、胰管内超声、血管造影等，目前胰腺癌尚无高特异性、灵敏的检测生物标志物，用于胰腺癌的血清蛋白标志物有CA19-9、CEA、CA50、CA242等，但这些标志物常用于晚期胰腺癌辅助诊断、疗效评估、转移复发监控等，用于早期预示胰腺癌普遍灵敏度不够。因此，急需寻找一种高灵敏度的标志物，为早期预示胰腺癌奠定基础。

糖类抗原19-9（CA199）是一种含黏液成分的大分子糖蛋白，可表达于多种细胞包括肿瘤细胞表面。在判断大肠癌患者临床分期方面，CA199是比CEA更为敏感的指标。CA199与肿瘤大小、淋巴结转移及浸润深度相关，并可与其它指标联合应用提示血源性复发。CA199是大肠癌患者独立判断预后的指标，血清中高水平的CA199提示大肠癌患者生存期缩短，但是单独使用CA199指标准确度不高。半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（Cystatin S）是人类Cystatin家族成员，由CST4基因编码的含141个氨基酸的蛋白质，分子量为16.4Kda。Cystatin S分子中含有两个二硫键，为典型的分泌蛋白，分布于体液和分泌物中，如眼泪、唾液、血清、血浆等。据文献报道，CST4在胃癌组织中的表达量高于正常胃粘膜组织，在胃癌细胞系中的表达部位与胃癌组织较一致，且表达率随细胞系的分化程度降低而降低，从而提示CST4可能在胃癌的发生有关。但迄今为止，未见CST4与其他癌症相关的报道，也为见Cystatin S与CA199联合应用的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（Cystatin S）和糖类抗原19-9（CA199）在制备诊断和预示大肠癌或胰腺癌标志物中的应用；本发明的目的之二在于提供大肠癌或胰腺癌标志物的捕获剂；本发明的目的之三在于提供含有前述捕获剂的试剂盒；本发明的目的之四在于提供试剂盒建立计算诊断和预示大肠癌或胰腺癌阈值的方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原19-9在制备诊断和预示大肠癌或胰腺癌标志物中的应用，所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述糖类抗原19-9的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述诊断和预示为诊断、疗效评估或转移复发监控。

2.大肠癌或胰腺癌标志物的捕获剂，所述标志物为半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原19-9，所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述糖类抗原19-9的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述捕获剂为识别半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原19-9的特异性抗体。

3.含有所述捕获剂的试剂盒。

优选的，所述试剂盒为检测血清中半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原19-9浓度的试剂盒。

优选的，所述试剂盒为酶联免疫检测试剂盒。

更优选的，所述试剂盒含有包被有单克隆抗体的固相载体、生物素标记的多克隆抗体和显色底物。

更优选的，所述单克隆抗体为鼠抗人Cystatin S单克隆抗体，所述多克隆抗体为兔抗人Cystatin S多克隆抗体，所述显色底物为四甲基联苯胺。