[发明专利]CDT-2的新用途以及利用其促进微生物细胞转运木寡糖的方法及其应用

权利要求书

1.CDT-2蛋白作为木寡糖转运蛋白的应用，能将木寡糖由微生物的胞外转运至胞内，进而对木寡糖加以利用；所述CDT-2蛋白为：

1)来源于粗糙脉孢菌氨基酸残基序列如序列表中序列1所示的蛋白；或

2)以序列表中序列2所示基因编码的蛋白；

所述微生物包括酵母属(Saccharomyces sp.)的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、摩纳酵母(Saccharomyces monacensis)、贝酵母(Saccharomyces bayanus)、巴氏酵母(Saccharomyces pastorianus)、卡氏酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、裂殖酵母(Saccharomyces pombe)，克鲁维酵母菌属(Kluyveromyces sp.)的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxiamus)、乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)、脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)，树干毕赤酵母(Pichia stipites)、嗜热侧孢霉(Sporotrichum thermophile)、休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)和粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述木寡糖是由2-10个木糖通过-1,4-糖苷键结合而成的低度聚合糖类。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述木寡糖是包括木二糖、木三糖、木四糖、木五糖在内的低聚木糖。

4.一种利用CDT-2蛋白获得及促进微生物转运木寡糖的方法，是将权利要求1所述CDT-2蛋白的编码基因导入所述的微生物菌株中，CDT-2蛋白将木寡糖转运至微生物胞内得到重组微生物菌株，与出发菌株相比，所述重组菌株获得或提高木寡糖转运能力。

5.GH43-2蛋白作为木糖苷酶的应用，能将木寡糖水解为木糖；所述木寡糖是由2-10个木糖通过-1,4-糖苷键结合而成的低度聚合糖类；所述GH43-2蛋白为来源于粗糙脉孢菌氨基酸残基序列如序列表中序列3所示的蛋白，其编码基因的核苷酸序列如序列表中序列4所示。

6.一种利用GH43-2蛋白获得及促进微生物水解木寡糖的方法，是将权利要求5所述GH43-2蛋白的编码基因导入权利要求1所述的微生物菌株中，GH43-2蛋白将木寡糖水解为木糖得到重组微生物菌株，与出发菌株相比，所述重组菌株获得或提高木寡糖水解能力。

7.使微生物获得或提高木寡糖转运能力和水解木寡糖能力的重组菌，是将权利要求1所述CDT-2蛋白的编码基因和权利要求5所述GH43-2蛋白的编码基因导入权利要求1所述微生物中之一得到的微生物菌株。

8.根据权利要求7所述重组菌，其特征在于，所述微生物为酿酒酵母菌，将所述CDT-2蛋白的编码基因和所述GH43-2蛋白的编码基因导入酿酒酵母菌得到的双基因共表达重组酿酒酵母菌株命名为E(1900+8114G)。

9.一种使微生物获得或提高木寡糖转运和水解木寡糖的方法，是将权利要求1所述CDT-2蛋白的编码基因和权利要求5所述GH43-2蛋白的编码基因导入权利要求1所述微生物中之一得到重组菌，能将木寡糖从微生物胞外转运至胞内，并在胞内被水解为木糖，从而使微生物获得或提高木寡糖转运的能力和水解木寡糖的能力。