[发明专利]Cystatin S和CA15-3在制备诊断和预示乳腺癌标志物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，涉及半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（Cystatin S）与糖类抗原15-3（CA15-3）在制备诊断和预示乳腺癌标志物中的应用。

背景技术

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率逐年上升，居全球女性发病和死亡第一位，成为女性健康的重大威胁。据国际癌症研究中心（International Agency for Research on Cancer，IARC）报告，2008年全球女性新发乳腺癌138万例，占女性恶性肿瘤发病的22.9%，死亡46万例，占女性恶性肿瘤死亡的13.7%。2010年《中国乳腺疾病调查报告》指出，中国乳腺癌发病率的增长速度高出西方国家1～2个百分点，并呈现出明显的年轻化趋势，每年约有20余万女性罹患乳腺癌；仅2003-2009年间，中国城市乳腺癌死亡率增长了38.91%。目前对乳腺癌仍缺乏有效的病因学预防手段，因此二级预防显得尤为重要。乳腺癌筛查是实现乳腺癌早发现、早诊断和早治疗的重要的二级预防手段。大量研究表明，筛查的实施是近年来欧美各国乳腺癌死亡率下降的主要原因之一。合理的筛查能够早期发现乳腺癌，提高治愈率，增加“保乳”手术的机会，减少术后辅助治疗，节省医疗费用，提高患者生活质量。为此，WHO已将乳腺癌列为应开展人群筛查的癌症类别之一。

美国疾病检测中心曾统计指出，乳腺癌的早期治愈率可达97%，而进展期后的治愈率则只有40%左右。因此，做到早期诊断和早期治疗尤为重要，可大大提高乳腺癌患者的生存率和生活质量。活组织病理检查以及影像学检查等方法诊断准确度较高，但当患者确诊时往往已处于中晚期，增加了治疗的复杂性。目前很多研究发现血清肿瘤标志物可用于肿瘤的诊断，现有技术公开了以糖类抗原15-3（CA15-3）为肿瘤标志物诊断乳腺癌，但是单一标志物诊断存在假阳性，并且不能用于诊断早期乳腺癌。因此，急需开发一些新的具有诊断价值的乳腺癌血清标志物，理想的乳腺癌标志物需要在恶变的早期阶段即能敏感和特异性地从外周血中检出。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（Cystatin S）和CA15-3在制备检测乳腺癌的标志物中的应用；本发明的目的之二在于提供乳腺癌标志物的捕获剂；本发明的目的之三在于提供含有上述捕获剂的试剂盒；本发明的目的之四在于提供试剂盒建立计算诊断和预示乳腺癌阈值的方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原15-3在制备诊断和预示乳腺癌标志物中的应用，所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述糖类抗原15-3的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述诊断和预示为诊断、疗效评估或转移复发监控。

2.乳腺癌标志物的捕获剂，其特征在于：所述标志物为半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原15-3，所述半胱氨酸蛋白酶抑制剂S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述糖类抗原15-3的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

优选的，所述捕获剂为识别半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原15-3的特异性抗体。

3.含有权利要求3或4所述捕获剂的试剂盒。

优选的，所述试剂盒为检测血清中半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原15-3浓度的试剂盒。

更优选的，所述试剂盒为酶联免疫检测试剂盒。

更优选的，所述试剂盒含有包被有单克隆抗体的固相载体、生物素标记的多克隆抗体和显色底物。

最优选的，所述单克隆抗体为鼠抗人Cystatin S单克隆抗体，所述多克隆抗体为兔抗人Cystatin S多克隆抗体，所述显色底物为四甲基联苯胺。

4.利用所述试剂盒建立计算诊断和预示乳腺癌阈值的方法，用所述试剂盒检测半胱氨酸蛋白酶抑制剂S和糖类抗原15-3的浓度，根据P=exp（-4.147+0.664*X1+0.698*X2）]/[1+exp（-4.147+0.664*X1+0.698*X2）]计算阈值P，当P大于0.5时，判断为阳性；当P小于或等于0.5时，判断为阴性；

其中X1为Cystatin S的浓度，单位为pg/mL；X2为糖类抗原15-3的浓度，单位为ng/mL。