[发明专利]脉羊耳兰提取物单体化合物、制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及植物单体化合物，更具体的说涉及脉羊耳兰提取物单体化合物、制备方法及其应用。

技术背景

脉羊耳兰又名见血清，多年生草本。根状茎发达，褐色，横卧，其上着生细长的根数条；假鳞茎细长，圆柱形，长达8cm，粗6mm，具叶3-5枚。叶卵形至长圆形，长10-15cm，先端渐尖，全缘，基部鞘状抱茎。总状花序疏散，长7-15cm；苞片细小；萼片和花瓣常为黄绿色，长约8mm，侧面2枚萼片狭长圆形，中萼片狭长圆形，花瓣线形；唇瓣紫色或紫红色，卵形或倒卵形，先端钝或凹入，基部有2个小瘤体；蕊柱近先端的翅钝圆，基部稍膨大鼓出。蒴果纺锤形。《民间常用草药汇编》记载脉羊耳兰具有清血，凉血，止血。治牙痛作用；酒泡服治跌打损伤。《四川常用中草药》记载具有生新散瘀，清肺，止吐血。治各种吐血，劳伤咳嗽，肺肾阴虚咯血，肠风下血，红崩，拔脓生肌，刀伤。

研究报道，用活性炭处理过的脉羊耳兰水煎剂（1:1)，敷于局部，对切断狗、猴股动脉或截断麻醉狗后肢引起的出血，有止血作用。动物下台后，活动、食欲正常,48小时内无继发出血。对兔肝、脾切口，4分钟止血，4-12天后无继发出血，切口上有一层薄膜覆盖，药物已被吸收，基本上无粘连。体外试验，能使人和兔抗凝血液的红细胞凝集。缩短全血凝时间。取脉羊耳兰全草切碎烘干，用水煮沸3次，每次沸腾30分钟，合并煎煮液、浓缩、离心，取上清液调成1:1浓度的溶液，经活性炭处理和高压灭菌后备用。临用时以消毒纱布或棉球蘸药液置于伤口或手术切口，稍加压迫。曾用于胃次全切除，剖腹探查，包皮环切，肿瘤切除，阑尾切除，宫颈息肉切除，胆总管切开引流，疝、肠、子宫修补，剖腹产及绝育，各种外伤，拔牙，拔甲，鼻出血，囊肿切除等手术计38例。止血最短时间45秒，个别长达3分30秒，平均为2分钟左右。全部手术的皮肤、肌层和部分脏器切口的中小血管和广泛性渗血，均未用止血钳和结扎，也不必清创即缝合，术后未发现粘连以及其他副作用和不良反应。

中国专利申请（CN201210292193.3）公开了一种吡咯里西啶生物碱及其用途，该专利采提取吡咯里西啶生物碱的原药材与本发明是相同的，吡咯里西啶生物碱作为抗炎药物用于预防或治疗由NO，肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6炎症介质的释放导致的炎症。在该专利的权利要求1中公开了其母核与多个官能团相结合的诸多可能性，是本发明提供的结构式（Ⅱ）的一种上位概念，且在该专利申请文件中也没有公开结构式（Ⅱ）的具体结构，制备方法和鉴别数据。本领域技术人员也不可能在对比文件提供的资料的基础上得到该物质的结构，应该是不能做为本发明的现有技术的。

发明内容

本发明提供了具有共同母核的脉羊耳兰提取物单体，并通过药理实验确认脉羊耳兰提取物单体在解热、抗炎和镇痛方面的应用。具有如下结构：

结构式（Ⅰ）中，R₁为-H或结构式（Ⅱ）；

所述结构式（Ⅱ）为：

脉羊耳兰提取物单体为化合物A或化合物B中的一种；

其中，化合物A命名为：8-(3-羟基异丙戊基)-2,2-二甲基苯并二氢吡喃-6-羧酸

（8-(3-hydroxyisoamyl)-2,2-dimethylchroman-6-carboxylic acid）；

化合物B命名为：（六氢-1H-吡咯烷-1-基）甲基-（3-羟基-3-甲基丁基）-2,2-二甲基苯并二氢吡喃-6-羧酸乙酯

(hexahydro-1H-pyrrolizin-1-yl)methyl8-(3-hydroxy-3-methylbutyl)-2,2-dimethylch roman-6-carboxylate）；

脉羊耳兰提取物单体的制备方法，包括以下步骤：

1）用浓度高于70%的乙醇提取脉羊耳兰干燥药材，收集提取溶液；

2）提取溶液加水稀释至1.5倍以上，减压回收乙醇至无醇味，静置，取上清液，上大孔树脂柱，用水洗脱至洗脱液无色；

3）用30%乙醇溶液洗脱，至洗脱液无色；

4）用50%的乙醇洗脱，分段接收洗脱液，合并前段洗脱液中主要含物质A的洗脱液作为洗脱液A；

5）合并后段主要含物质B的洗脱液作为洗脱液B；

6）分别回收干燥洗脱液A、B，用乙酸乙酯溶解，得到上样物质A、B；

7）将上样物质A上样硅胶层析柱，洗脱，合并洗脱液浓缩结晶，得到Ａ物质结晶；