[发明专利]在C端水解P物质的胆碱酯酶在制备速激肽拮抗剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及治疗或预防体内过量速激肽介导的病症的药物，特别地涉及在P物质等速激肽C-端水解氨基酸残基的胆碱酯酶在制备速激肽拮抗剂或反向激动剂中的应用。

背景技术

速激肽(Tachykinins,TKs)是具有下述共同酰胺化羧基末端系列的一簇肽。速激肽C末端有-Phe-X-Gly-Leu-Met-NH₂共同结构，是一种在哺乳动物包括人体内产生的具相似药理活性神经肽，有着多种生理功能，速激肽的名字源于它们对平滑肌组织的刺激作用。哺乳类动物的速激肽主要包括P物质(Substance P，SP)，神经激肽A(Neurokinin A，NKA)和神经激肽B(Neurokinin B，NKB)三种。速激肽广泛分布在中枢神经系统和周围神经系统，由神经释放，也可由非神经组织产生。

速激肽受体包括NK-1，NK-2和NK-3三种类型，广泛分布于神经系统和外周组织中，属G蛋白共役型受体，速激肽受体cDN已被克隆。受体激活后能够引起多种生理效应，并且在某些疾病状态下，连激肽受体的表达和分布具有可塑性，速激肽受体拮抗剂的研制将进一步推动速激肽受体的研究并有广泛的应用前景。

速激肽受体是有7个跨膜结构的G蛋白共役型受体。速激肽与相应受体结合，激活G蛋白，G蛋白激活磷脂酶C，使二磷酸肌醇酯降解成三磷酸肌醇(Inositol trisphosphate,IP3)和二酰甘油(DG)，IP3作用于肌浆网膜上的特异性受体，释放细胞内贮存的Ca2＋，DG通过蛋白激酶C打开肌浆膜的L-型钙通道，细胞内Ca2+的升高引起相应组织的生理效应［Khawaja AW,Rogers DF.Tachykinins:receptor to effector.Int J Biochem Cell Biol,1996,28:721-738.］。

以P物质（SP）为例，研究表明，SP能以神经内分泌的方式作用于各种免疫细胞，参与免疫调节；SP还影响活化的淋巴细胞合成细胞因子，进而介导和调节免疫炎症反应；SP对T淋巴细胞的趋化作用具有剂量依赖性和受体依赖性，在炎症时的免疫细胞募集过程中发挥重要作用；SP影响辅助性T细胞合成细胞因子；SP及其C-端片段对中性粒细胞有启动效应，还可延缓中性粒细胞的凋亡，表明SP在炎症的迁延过程中起作用。另外，SP还是中性粒细胞的趋化因子，10^-9mol/L的SP可直接影响其向炎症部位的迁移。SP可以激活肥大细胞，引起胞内Ca²⁺动员和细胞脱颗粒，释放组胺。人皮肤郎格罕斯细胞表面存在丰富的SP结合位点，它们被激活后可以抑制抗原提呈过程。SP也可诱导骨髓细胞产生IL-1和IL-6。SP对其他系统的作用有：(1)神经系统，SP作为一种对靶组织起兴奋作用的介质，从初级传入终末释放，涉及痛觉传递；(2)消化系统，SP具有收缩消化道平滑肌的作用，可刺激唾液分泌增加，还可促进大肠和小肠内水和电解质的分泌；(3)循环系统，SP可使血管扩张，血管通透性增加和血浆蛋白渗出，脑室内注射SP可引起大鼠平均血压升高；(4)呼吸系统，SP神经元参与氧不足的换气发动，使呼吸道平滑肌紧张性加强，致支气管痉挛、肺内水肿；(5)泌尿系统，SP能使输尿管、膀胱平滑肌收缩，使ADH释放量增加，引起肾血流量增加、尿量增加；(6)被皮系统，人皮肤注射SP引起局部红肿、瘙痒反应；在皮肤损伤时期，SP参与局部炎症反应及免疫反应。综上所述，SP不仅是一种重要的神经递质，而且还是神经系统、内分泌系统和免疫系统共同的化学语言，是传递信息、调节机体反应的重要信使(参见方秀斌《神经肽与神经营养因子》42-55人民卫生出版社)。SP在各种组织中呈现出纷繁多样的生理效应，使其受体激动剂和拮抗剂具有了广阔的应用前景。　

SP的结构和活性关系密切，羧基端（C-端）的氨基酸断裂，活性则明显降低或消失。根据对SP不同长短的片段及各种D型氨基酸取代衍生物的活性研究，认为C端6个氨基酸为其生物活性所必需的。Duplaa等用相应的D型氨基酸分别取代SP的各个氨基酸残基后进行的生物活性及受体结合分析发现，第6，7，8，9，11位的氨基酸残基被D型氨基酸取代后，受体结合能力几乎完全丧失（参见路长林等《神经肽基础与临床》134第二军医大学出版社）