[发明专利]人前列腺癌新鲜组织激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型的构建方法

权利要求书

1.一种人前列腺癌新鲜组织激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型的构建方法，其特征在于：

a.首先在雄性裸鼠皮下埋藏含10mg睾酮缓释胶囊一周；

b.取人前列腺癌新鲜组织原代培养后得到的贴壁原代细胞，将胶原酶消化后的原代细胞以1:1比例混合人工基膜后，种植到上述补充了雄激素的BULB/C裸鼠单侧肾被膜下，40-60天后得到人激素依赖性前列腺癌裸鼠模型，传代于上述该系鼠的前列腺前叶，即可得到稳定的人激素依赖性前列腺癌裸鼠原位模型；

c.待上述裸鼠肿瘤生长>50mm³后进行去势，肿瘤生长受到抑制后出现再度增长，将肿瘤传代给手术去势及不补充雄激素的裸鼠，待肿瘤长大后经传代可得到人激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型。

2.根据权利要求1所述人前列腺癌新鲜组织激素非依赖性前列腺癌裸鼠模型的构建方法，其特征在于：所述原代细胞是将人体新鲜前列腺癌标本经生理盐水冲洗，加胶原酶Ⅱ后充分切碎，37℃无菌二氧化碳孵育箱消化30-60分钟，加等量含10%FBS的1640进行离心、弃上清将剩余组织和少量余液均匀涂抹在培养皿中，贴壁3-4小时，加入含1%双抗和10%FBS的1640约3mL，置于37℃无菌二氧化碳孵育箱，培养72小时后，行换液处理，每皿加入含1%双抗和10%FBS的1640约6mL，2-3天后重复换液3次，即培养7-10天后，可得较纯净的贴壁原代细胞。