[发明专利]酸枣仁安神催眠活性皂苷组分及其分离纯化方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离领域，特别涉及酸枣仁安神催眠活性皂苷组分及其分离纯化方法与应用。

背景技术

随着社会的发展，生活节奏的加快，人们的生活中潜伏着更多对失败的恐惧和焦虑。竟争与拼博，给人们的精神带来了巨大的压力，失眠、焦虑症发病率急剧上升。失眠是最常见的一种睡眠障碍，对人体机能、智力以及免疫力有巨大危害。长期失眠，不仅损害人的思维活动，而且会影响人的免疫系统，最终会缩短生命。在临床上常用具有镇静催眠作用的化学合成药物治疗失眠。调查发现，约44%的患者长期服用苯二氮卓类（BDZ）和巴比妥类催眠药物，但这些药物因具有副作用及成瘾性使其应用受到限制。巴比妥钠类药物随剂量逐渐增加而产生镇静、催眠、嗜睡、抗惊厥和麻醉作用，中毒剂量可致呼吸麻痹而死亡。中医药具有良好安神镇静作用，而且不良反应少，具有不成瘾，也不会产生依赖性、耐受性等显著优点，具有广阔的应用前景。

已有前人对酸枣仁中的黄酮、皂苷、油脂和生物碱等分别进行催眠活性的研究。但各研究结果之间存在一些差异，例如郭胜民等（中药材.1998，（21）11：578～579;西北医学杂志.1996，（8）11：166～168）报道酸枣仁中总黄酮、总皂苷均具有催眠活性，Woo.Siekwoo等（Phytochemistry.1978,18:353～355）也认为酸枣仁皂苷A为有效成分之一，但吴树勋等（中国中药杂志.1991，16(7)：435～437）研究发现酸枣仁皂甙A无中枢神经抑制作用,相反却能加强苯丙胺的兴奋作用,认为酸枣仁皂苷A可能不是安神作用的有效成分；袁昌鲁等(中药通报.1987，12(3)：34～35)通过实验指出黄酮类成分也是镇静催眠的有效成分之一,而石油醚提取的脂肪油无此作用，但赵秋贤等（西安医科大学学报.1995，（16）4：421～423）研究了酸枣仁脂肪油对中枢神经系统的影响，认为酸枣仁油也可能是镇静催眠的有效成分。但是酸枣仁中安神催眠活性成分的鉴定和分离方法对人类的健康有着重要的意义，仍有很多需要进行研究。

发明内容

为克服现有技术的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种酸枣仁安神催眠活性皂苷组分的分离纯化方法。该方法为一条新的、不引入具有明显毒性溶剂和试剂的、相对安全的天然产物提取分离方法。

本发明的另一目的在于提供上述分离纯化方法制备的酸枣仁安神催眠活性皂苷组分。

本发明的再一目的在于提供所述的酸枣仁安神催眠活性皂苷组分的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种酸枣仁安神催眠活性皂苷组分的分离纯化方法，包括以下的步骤：

（1）酸枣仁安神催眠活性皂苷样品的制备：

酸枣仁经炒制、粉碎后，过40目筛，60℃干燥24h，制备获得酸枣仁粉；将酸枣仁粉按索式提取法用10倍质量的石油醚在60℃～65℃脱脂4h，获得残渣和酸枣仁油；取出残渣，干燥、研碎、过40目筛后获得脱脂酸枣仁粉；将脱脂酸枣仁粉用25倍体积分数为70％的乙醇在85℃～90℃条件下回流提取3h，抽滤获得残渣Ⅰ和醇液；将醇液在60℃下减压蒸干至膏状，加水溶解，并过滤除杂后获得水溶液；向水溶液加1倍体积的水饱和正丁醇萃取，弃水层，获取正丁醇层I；将正丁醇层I用1倍体积的0.1M的KOH溶液碱化处理，获得碱水层和正丁醇层II；将正丁醇层II减压蒸干，即得到粗皂苷；将粗皂苷经过三次溶解-过滤-室温干燥，即得到酸枣仁安神催眠活性皂苷样品。

（2）酸枣仁安神催眠活性皂苷组分的分离纯化方法：

1）柱层析分离纯化

将步骤（1）制备的皂苷样品用水配制成浓度为25mg/ml的上样皂苷样液，向装有吸附剂的层析柱中上样10ml，体积份数为60%乙醇溶液作洗脱液40ml，调节蠕动泵转速使流速为0.5ml/min，每10ml一管收集洗脱液；从洗脱液中每管取1ml，加入1ml质量份数为2%香草醛溶液，2ml浓硫酸，经紫外光分光光度计扫描发现在507nm处有最大吸收峰的洗脱液为主峰洗脱液，将主峰洗脱液收集备用。

2）薄层层析分离纯化