[发明专利]一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法

权利要求书

1.一种多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1）.发酵菌种的制备步骤

1.1）嗜酸乳杆菌种子液的制备

1.1.1）一级嗜酸乳杆菌种子培养：从嗜酸乳杆菌斜面菌种挑取一嗜酸乳杆菌环菌体到10ml嗜酸乳杆菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到一级嗜酸乳杆菌种子液；

1.1.2）二级嗜酸乳杆菌种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.1.1）所得的一级嗜酸乳杆菌种子液到100mL嗜酸乳杆菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到嗜酸乳杆菌种子液，备用；

1.2）德氏乳杆菌种子液的制备

1.2.1）一级德氏乳杆菌种子培养：从德氏乳杆菌斜面菌种挑取一德氏乳杆菌环菌体到10ml德氏乳杆菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃，静置培养24小时，得到一级德氏乳杆菌种子液；

1.2.2）二级德氏乳杆菌种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.2.1）所得的一级德氏乳杆菌种子液到100mL德氏乳杆菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，37℃静置培养24小时，得到德氏乳杆菌种子液，备用；

1.3）酵母菌种子液的制备

1.3.1）一级种子培养：从酵母菌斜面菌种挑取一酵母菌环菌体到10mL酵母菌斜面培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃，培养24小时，得到一级酵母菌种子液；

1.3.2）二级种子扩大培养：吸取5mL由步骤1.3.1）所得的一级酵母菌种子液到100mL酵母菌种子培养基中，置于恒温调速摇床中进行菌体培养，转速为150r/min，30℃，培养24小时，得到酵母菌种子液，备用；

2）.豆粕及鱼溶浆蛋白与种子培养液的混合步骤

2.1）将豆粕粉碎，其大小为3mm；

2.2）将鱼溶浆蛋白溶于自来水中，搅拌至充分溶解后，加入上述粉碎后的豆粕，拌匀后置于121℃灭菌15min，取出冷却后，接入由步骤1制备的嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液，充分混合均匀，其中嗜酸乳杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和酵母菌种子液的接入量均为鱼溶浆蛋白与豆粕重量之和的5-20wt.%，混合后，所得混合物的水分含量控制在30-55wt%；所述豆粕与鱼溶浆蛋白的重量比例为10～30∶90～70；

3）发酵步骤

将由步骤2所得的混合物置于38-45℃的温度下进行发酵，保温3-5天后，得到发酵产物，经过60-80℃反复干燥后微粉碎即得成品。

2.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌斜面培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL。

3.如权利要求2所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。

4.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌种子培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，蒸馏水1000mL。

5.如权利要求4所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌种子培养基经121℃灭菌15min。

6.如权利要求1所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述德氏乳杆菌斜面培养基配方为：蛋白陈10.0g，牛肉粉5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温801.0mL，磷酸氢二钾2.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，琼脂粉15.0g，蒸馏水1000mL。

7.如权利要求6所述的多菌种固态发酵制备鱼溶浆蛋白和豆粕混合原料的方法，其特征在于，所述德氏乳杆菌斜面培养基经121℃灭菌15min。