[发明专利]一株沙雷氏菌（Serratia）菌株及其粗毒素的高效除草活性

权利要求书

1.一株沙雷氏菌（Serratia）菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期 2013年03月20日，保藏编号：CGMCC No.7340，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.权利要求1所述沙雷氏菌（Serratia）菌株（编号Ha1），其特征在于：此菌株的粗毒素对马唐、反枝苋、稗草、狗尾草、虎尾草等杂草均有一定的抑制效果。

3.权利要求1所述的沙雷氏菌（Serratia）菌株（编号Ha1）粗毒素的制备方法：（1）种子液制备，LB培养基配方：酵母浸粉5g，蛋白胨—10g，NaCl—10g，蒸馏水1000mL，调pH至7.0~7.5；固体LB培养基在上述配方基础上添加琼脂—10g/L；将按上述配方配制好的培养基倒入250mL三角瓶，每瓶100mL，121℃高压灭菌20min，冷却后在超净台内，无菌操作条件下，将保存在-80℃甘油中的沙雷氏菌（Serratia）(Ha1菌株)划线接种于平板培养基上，36h后取一环菌体接种于LB液体培养基里，转速150 rpm的摇床中37℃振荡培养24h，即为种子液；（2）发酵罐发酵，发酵罐培养液配方：酵母浸粉—5g，蛋白胨—10g，NaCl—10g，蒸馏水1000mL，调pH至7.0~7.5；50L发酵罐按70%装上述培养基，装料后在 120℃，0.12MPa下灭菌30分钟；冷却至30℃左右后按3％的接种量接种制备好的种子液；培养温度35℃，通气量1:1(v/v·min)，发酵96h完毕；（3）将发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取24h，萃取3次，期间不断震荡使其充分萃取，之后分液得到乙酸乙酯相，减压浓缩至干，得到的棕黄色晶膏状物质即为粗毒素。