[发明专利]细胞散射光多位置检测方法及细胞分析仪

说明书

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种细胞散射光多位置检测方法及细胞分析仪。

背景技术

流式细胞仪（flow cytometer,FCM）是依据光散射理论的一种细胞分析仪器。当激光照射到流动室内流过的单个排列的每一个细胞时，由于细胞的物理特性，部分光线从细胞上经不同的角度散射。其中，前向小角度散射光的光强可以反映细胞体积；大角度散射光的光强可以反映细胞核复杂度和细胞颗粒的信息；而侧向散射光的光强可以反应细胞膜、核膜、细胞质的变化，从而对细胞进行分类，和对细胞DAN、RNA进行分析。

现有的流式细胞仪是通过鞘流技术将细胞排成1列，逐个通过鞘流器的光学检测窗口，激光器产生的激光照射在光学检测窗口，单个细胞依次受到激光照射，散射出前向0度、10度散射光和90度散射光。每个前向和90度方向上安置一套检测装置，光电倍增管将散射光强度转换为电信号，供计算机分析。

细胞散射光本来就不强，在90度方向的散射光还要进行2次、3次甚至更多次的分光，以进行偏振光、消偏振光、荧光激发光等不同检测，每次分光其强度都至少减弱50%。为了检测细胞的90度散射光信息不得不用高增益的光电倍增管，无法避免噪音加大，这使流式细胞仪的成本加大，且整台仪器的准确性和稳定性也难以进一步提高。

发明内容

本发明的目的是设计一种细胞散射光多位置检测方法，在细胞散射光的每个角度的多个位置设置检测装置，获得的细胞散射光的强度加倍。

本发明的另一目的是根据上述本细胞散射光的多位置检测方法设计一种细胞散射光多位置检测细胞分析仪，在与激光方向成90°的细胞的散射光平面上的多点设置检测装置，以成倍获得细胞散射光，可用较低增益的光电倍增管，降低成本，提高仪器整体的准确性和稳定性。

当激光照射在单个细胞上，细胞在90°方向的散射光处于与激光方向成90°的平面上，那么在这个平面上均可检测细胞90°散射光，且在此平面上与细胞距离相等处检测所得的细胞散射光信息是等同的。

本发明细胞散射光多位置检测方法是在与激光入射方向成90°的细胞的散射光的平面上，取2～4个检测点，检测细胞的90°散射光。

所述的2～4个细胞90°散射光的检测点与鞘流管中心线的距离相等。

当所用鞘流管截面为矩形时，取在鞘流管壁上下或左右的以鞘流管中心线为对称的2个点为检测点，或者取在鞘流管壁外周以鞘流管中心线两两对称的4个点为检测点。

根据上述本发明细胞散射光的多位置检测方法设计的细胞散射光多位置检测细胞分析仪，包括激光照射机构、细胞鞘流机构、散射光采集机构和信号分析处理机构，细胞鞘流机构使待分析的细胞在鞘流液中排成单列沿其鞘流管直线流动，激光照射机构产生的激光对鞘流管内的细胞依次进行照射，激光入射方向与鞘流管走向垂直，散射光采集机构包括1套前向散射光检测器和2～4套90°散射光检测器，前向散射光检测器设置于与激光同向、前方10°位置，90°散射光检测器设置于激光入射处与激光入射方向垂直的平面上。

各90°散射光检测器所处位置与该鞘流管中心线的距离相等。可采用相同的散射光检测器模块。

当所用鞘流管截面为矩形时，在激光入射处与激光入射方向垂直的平面上的90°散射光检测器位于鞘流管壁上下或左右的以鞘流管中心线为对称的2个点，或者位于鞘流管壁外周以鞘流管中心线两两对称的4个点。

最佳方案为在激光入射处与激光入射方向垂直的平面上的90°散射光检测器位于鞘流管壁左右的以鞘流管中心线为对称的2个点，此两点的连线为水平线。

与现有技术相比，本发明细胞散射光多位置检测方法及细胞分析仪的优点为：1、在原检测光路的基础上，增加了90°散射光的检测通道，获得的90°散射光信号光强是原设计的2～4倍；2、由于获得的90°散射光信号光强高，信噪比提高，细胞分析的准确性和稳定性提高；3、无需配用高增益的光电倍增管，降低了对仪器电路放大倍数和去噪功能的要求，仪器成本降低，可靠性提高。

附图说明

图1为本细胞散射光多位置检测方法实施例原理示意图；

图2为本细胞散射光多位置检测细胞分析仪实施例结构示意图。

图中标号为：

1、激光照射机构，2、90°散射光检测器，3、细胞鞘流机构，4、前向散射光检测器。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例进一步详细说明本发明。

细胞散射光多位置检测方法实施例