[发明专利]长双歧杆菌和动物双歧杆菌的复合菌剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种长双歧杆菌和动物双歧杆菌的复合菌剂及其制备方法。

背景技术

巴马是我国广西壮族自治区的一个瑶族自治县，位于广西西北部，这里居住着瑶、壮、汉等12个民族，总人口24万多人，与百色、田阳、田东、平果等市县毗邻。巴马是百岁老人分布率最高的地区，被誉为“世界长寿之乡”。1991年11月1日在日本东京召开的国际自然医学会第13次会议上，被命名为世界第五个长寿之乡，2003年11月，国际自然医学会授予巴马“世界长寿之乡”证书。据第二次到第五次全国人口普查，巴马百岁以上寿星占人口的比例之高都居世界五个长寿区之首。

为了揭开巴马长寿之谜，国内专家对此开展了长期的研究。研究发现，有一个共同的特征，这些老人肠道内有益菌的数量是一般人体内有益菌数量的100至1000倍，这些有益菌在人体肠道内与人共生，形成一道益生菌保护屏障-益生菌菌膜，将排泄物和消化道隔离开，抑制体内其他有害菌、腐败菌的滋生，不会形成毒素。

益生菌菌膜是多种有益菌组成的生物平衡结构，当饮食不规律，经常吸烟、饮酒、运动减少、情绪变化、机体老化，特别是过量使用抗生素之后，益生菌菌膜就会受损，腹泻、便秘等各种消化道疾病的产生。益生菌菌膜破坏后，有害菌、腐败菌就会趁机滋生，产生毒素而损伤肝脏等脏器。体内毒素堆积，使容颜衰老，皮肤晦暗。可以说，没有肠道益生菌菌膜，人的健康就会严重受损。健康人体内的有益菌是病人的50倍以上，要想身体健康长寿，维护肠道微生态菌群的平衡，保持完好的益生菌菌膜是一种重要的方法。

双歧杆菌是人类肠道正常菌群中一类重要的微生物，它们对人类健康的有益作用已得到很多研究的证明。巴马地区长寿之谜除了与当地的自然环境、气候、生活习惯、饮食结构等因素有关外，经研究发现与长寿老人肠道中的益生菌菌群的关系密切。我们从当地老人肠道中分离到两株双歧杆菌，目的就是将这两种菌进行大量人工培养，然后再将这种菌用于其他人群，使其在其他人肠道内定植，并形成益生菌菌膜，达到促进人体健康的目的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种长双歧杆菌和动物双歧杆菌的复合菌剂及其制备方法。

为了实现本发明的目的，本发明采用的技术方案如下：本发明中的一种长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)，从广西巴马百岁老人粪便中采集，命名BAMA-B05/BAu-B1024，于2013年03月08日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号CGMCC No.7290。另外一种动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)，从广西巴马百岁老人粪便中采集，命名BAMA-B06/BAU-B0111，于2013年03月08日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号CGMCC No.7289。

本发明还具有如下特征：

1、一种长双歧杆菌和动物双歧杆菌的复合菌剂，由长双歧杆菌长亚种BAMA-B05/BAu-B1024和动物双歧杆菌乳亚种BAMA-B06/BAu-B0111复合而成，两种菌体的数量之比为1∶1。

2、一种长双歧杆菌和动物双歧杆菌的复合菌剂的其制备方法，培养基配方为，按质量百分数：低聚异麦芽糖1.0-10.0％、酵母膏0.5-5.0％、大豆蛋白胨0.5-5.0％、胰蛋白胨0.5-5.0％、乳糖1.0-10.0％和半胱氨酸0.01-0.50％，pH4.5-6.5，121℃灭菌20min，冷却后两种菌种一起接种；培养温度为30-38℃，培养时间为12-48h，培养结束后，5000rpm离心，然后加入冻干保护剂，混合均匀后，进行冷冻干燥，制得冻干菌粉，冻干菌粉的活菌数≥1.0×10¹⁰cfu/g。

3、培养基配方优选为：按质量百分数，低聚异麦芽糖2.0-3.0％、酵母膏1.0-1.5％、大豆蛋白胨1.0％、胰蛋白胨1.5％、乳糖2.0％和半胱氨酸0.05％，pH6.5，121℃灭菌20min。

以上所述的一种长双歧杆菌和动物双歧杆菌的复合菌剂的其制备方法，或者两种菌种单独接种，制得冻干菌粉后混合均匀。

本发明具有如下特点：