[发明专利]改进的苦参薄层色谱鉴别方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，涉及一种药物的真伪鉴别方法。

背景技术

苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根；味苦、性寒；归心、肝、胃、大肠、膀胱经；具有清热燥湿，杀虫，利尿的功效；用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风，外治滴虫性阴道炎。近年来，随着苦参市场用量的逐渐加大，其价格持续攀升，出现了很多以次充好、以假乱真的现象，不仅降低了药品质量，也给中药材市场造成极大的负面影响。

2010年版中国药典规定，苦参的鉴别采用薄层色谱法，具体方法如下：（1）取本品粉末0.5g，加浓氨试液0.3ml、三氯甲烷25mI，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品和槐定碱对照品，加乙醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-甲醇（8:3:0.5）为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水（2:4:2:1）10℃以下放置的上层溶液为展开剂，展开，展距同上，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的两个橙色斑点。（2）另取氧化苦参碱对照品，加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液和该对照品溶液各4μl，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（5:0.6:0.3）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色斑点。

上述薄层色谱鉴别方法通过鉴别苦参的指标成分苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱来判断苦参的真伪，存在以下问题：（1）供试品溶液的制备采用浸泡法，耗时较长（约需12小时），指标成分溶出率较低；（2）薄层色谱鉴别需用到两块薄层板，三种展开剂，两种显色剂，进行三次展开操作和四次显色操作，且两种展开剂的配制需要在10℃以下放置，显色剂碘化铋钾试液在常温下保存易产生沉淀，需现配现用，整个过程繁琐、耗时；（3）该方法的显色原理实际是先用碘化铋钾试液进行显色，再用亚硝酸钠乙醇试液进行脱色，在显色和脱色时剂量较难控制，容易造成显色过深或者脱色过度，影响对结果的判断。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种改进的苦参薄层色谱鉴别方法，供试品溶液的制备简单、省时；苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱三种组分能够在同一薄层板上展开；单一显色剂显色，显色斑点清晰，保留时间长，结果易于判断，且显色剂能够长期保存使用。

为达到上述目的，经研究，本发明提供如下技术方案：

改进的苦参薄层色谱鉴别方法，包括以下步骤：

a．对照品溶液的制备：取苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品和槐定碱对照品，分别加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；

b．供试品溶液的制备：取苦参供试品粉末1g，加浓氨试液0.3ml，三氯甲烷25ml，250W超声20分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；

c．展开及显色：吸取步骤a制得的三种对照品溶液和步骤b制得的供试品溶液各4μl，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以展开剂A展开，展距8cm，取出，晾干，再以展开剂B展开，展距8cm，取出，晾干，喷显色剂显色；所述展开剂A由甲苯、丙酮、乙醇和氨水按照体积比为6:8:2:0.28混合而成；所述展开剂B由甲醇和氯仿按照体积比为1.6:10混合而成；所述显色剂由碘化铋钾试液和0.6mol/L盐酸按照体积比为1:1混合而成；

d．结果判断：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色斑点，判断苦参供试品为真品，反之为伪品。