[发明专利]一种快速培养大丽轮枝孢菌的方法

说明书

技术领域

本发明属于大丽轮枝孢菌培养技术领域，尤其涉及一种快速培养大丽轮枝孢菌的方法。

背景技术

目前一般采用PDA培养基来培养大丽轮枝孢菌，由于大丽轮枝孢菌即使在足够的营养条件下生长依然非常缓慢，一般需要15天才能长满全皿用于刮取菌丝或打取菌块，无法满足短时间内获取大量菌丝体或者分生孢子的要求；同时，由于培养时间长，在培养过程中很容易污染杂菌。

发明内容

本发明提供了一种快速培养大丽轮枝孢菌的方法，旨在解决目前大丽轮枝孢菌在PDA培养基生长非常缓慢，无法满足短时间内获取大量菌丝体或者分生孢子的要求；同时由于培养时间长，在培养过程中很容易杂菌污染的问题。

本发明的目的在于提供一种快速培养大丽轮枝孢菌的方法，该方法包括以下步骤：

步骤一，在PDA培养基上培养大丽轮枝孢菌后，直接从培养基上打取菌块；

步骤二，用1ml无菌水洗涤菌块，获得分生孢子液；

步骤三，吸取分生孢子液滴到铺有灭菌滤纸的PDA培养基上，25℃培养7天；

步骤四，刮取菌丝至1.5ml离心管中，液氮速冻，-80℃保存，用于DNA的提取，同时用无菌水洗涤PDA培养基，用于配制分生孢子液

进一步，用1ml无菌水洗涤菌块，获得分生孢子液。

进一步，吸取分生孢子液滴到铺有灭菌滤纸的PDA培养基上，25℃培养7天。

本发明提供的快速培养大丽轮枝孢菌的方法，首先在PDA培养基上培养大丽轮枝孢菌后，直接从培养基上打取菌块；然后用1ml无菌水洗涤菌块，获得分生孢子液；最后吸取分生孢子液滴到铺有灭菌滤纸的PDA培养基上，25℃培养7天；刮取菌丝至1.5ml离心管中，液氮速冻，-80℃保存，用于DNA的提取；同时用无菌水洗涤PDA培养基，用于配制分生孢子液；本发明达到了简捷、易行、快速培养大丽轮枝孢菌的目的，能在短时间内培养出足量的菌丝和分生孢子用于DNA提取和接种实验，实用性强，具有较强的推广与应用价值。

附图说明

图1是本发明实施例提供的快速培养大丽轮枝菌的方法的流程图；

图2是采用本发明提供的方法培养7天后大丽轮枝孢菌的菌落形态。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定发明。

图1示出了本发明实施例提供的快速培养大丽轮枝菌的方法的实现流程。

该方法包括以下步骤：

在步骤S101中，在PDA培养基上培养大丽轮枝孢菌后，直接从培养基上打取菌块；

在步骤S102中，用1ml无菌水洗涤菌块，获得分生孢子液；

在步骤S103中，吸取分生孢子液滴到铺有灭菌滤纸的PDA培养基上，25℃培养7天。

在本发明实施例中，刮取菌丝至1.5ml离心管中，液氮速冻，-80℃保存，用于DNA的提取。

在本发明实施例中，用无菌水洗涤PDA培养基，用于配制分生孢子液。

下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。

本发明提供了一种简捷、易行、快速的培养大丽轮枝孢菌的方法，具体包括以下步骤：

1)在PDA上培养大丽轮枝孢菌后直接从培养基上打取菌块；

2)用1ml无菌水洗涤菌块获得分生孢子液；

3)吸取孢子液滴到铺有灭菌滤纸的PDA培养基上，25℃培养7d；

4)刮取菌丝至1.5ml离心管中，液氮速冻，-80℃保存，用于DNA的提取；或者用无菌水洗涤PDA培养基配制分生孢子液。

实施例：

1)挑选一株大丽轮枝菌菌株，在PDA培养基上培养后直接从培养基上打取菌块；

2)用1ml无菌水洗涤菌块获得分生孢子液；

3)吸取孢子液滴到铺有灭菌滤纸的PDA培养基上，25℃培养7d；

刮取菌丝至1.5ml离心管中，用于DNA提取。或者用无菌水洗涤PDA培养基配制分生孢子液。

本发明可在短时间内获得大量的大丽轮枝孢菌的菌丝体和分生孢子，从而用于DNA的提取或配制分生孢子液用于接种。图2中上面的图是利用本发明培养7天后菌落形态，下图是采用常规方法培养7天后菌落形态。