[发明专利]一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因，相关蛋白及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物基因工程技术领域，具体涉及一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因，相关蛋白及应用。

背景技术

转化生长因子β（Transforming Growth Factor beta，TGF-β）超家族是一类多效应细胞因子，在抑制肿瘤、细胞增殖、细胞分化、组织形成、世系决定、细胞迁移和细胞凋亡等多种生理过程中发挥重要的作用。TGF-β超家族成员包括转化生长因子β（TGF-β）、活化素(Activin)和节/骨形成蛋白（Bone Morphogenetic Protein, BMP）三个家族。狭义上的TGF-β通常指的是TGF-β家族。TGF-β1是以前体蛋白的形式编码，每种TGF-β1都是由一个单独的基因编码。TGF-β1前体蛋白是单链蛋白，分子量约为 13000D。TGF-β1蛋白前体在细胞内经过一系列的加工过程才分泌到细胞外。其中最重要的一步是前体蛋白的水解，将前体蛋白的N端切掉，切割位点处有RXXR的氨基酸序列标志，剩下的C端为TGF-β1 成熟肽序列。许多动物的TGF-β1的一级结构已经被阐明。人的TGF-β1由390个氨基酸组成，非洲爪蟾的TGF-β1由382个氨基酸组成，斑马鱼的TGF-β1有377个氨基酸组成。TGF-β1具有高度的保守性，尤其是在成熟肽序列部分。TGF-β1的功能主要与免疫相关。

尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus），属辐鳍鱼亚纲，鲈形目，鲈形亚目，丽鱼科，罗非鱼属。由于其具有生长快速、起捕率高、出肉率好，池塘饲养条件要求不高、较好适应网箱等特点而被广大养殖户认可，同时因其肉味鲜美、肉质细嫩，食性杂、耐低氧、繁殖强等特点，现成为世界水产业重点培养的一种淡水养殖鱼类，且被誉为未来动物性蛋白质的主要来源之一，也是我国非常重要的一类出口鱼类，但是现在由于病害导致罗非鱼养殖受到了重大的损失。常见的罗非鱼病主要可分为以下几类： 1.寄生虫性疾病：粘孢子虫病、车轮虫病、小瓜虫病、斜管虫病、头槽绦虫病、双穴吸虫病、指环虫病和三代虫病等；2.真菌性疾病：水霉病、鳃霉病等；3.细菌性疾病：运动性气单胞菌病、假单胞菌病、爱德华菌病、链球菌病、竖鳞病、细菌性败血病、细菌性赤皮病和细菌性烂鳃病等。这些罗非鱼疾病中，又以链球菌病最为恶劣，造成的损失最大。传统的治疗手段主要是使用抗生素，但是抗生素缺乏针对性，长期使用会使病原体产生耐药性，并且会影响水环境和涉及食品安全问题；也有通过在饲料中添加像益生菌、中草药添加剂、维生素等来增强鱼的免疫力；也有学者研究出了抗病的疫苗，但是发现疫苗对病原菌的变种效果不好。这些方法都没能突破性地解决罗非鱼疾病问题。所以，研制能显著提高尼罗罗非鱼抗病能力的免疫制剂是当前急需要攻破的课题。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因。

本发明的另一个目的是提供一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1。

本发明的另一个目的是提供一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因的应用。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。SEQ ID NO:1为编码序列（即cDNA序列，仅为外显子）。

一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1成熟肽基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，成熟肽基因的核苷酸序列对应于尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因cDNA全序列的808bp~1143bp的序列。

一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

一种尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1成熟肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。尼罗罗非鱼转化生长因子β1的ORF的第270位至第381位氨基酸序列相应的序列即尼罗罗非鱼转化生长因子β1成熟肽对应的序列。

一对用于扩增尼罗罗非鱼转化生长因子TGF-β1基因的引物，引物序列如SEQ ID NO:5~6所示。