[发明专利]牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联灭活疫苗及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，更具体是涉及一种预防牛传染性鼻气管炎和牛病毒性腹泻的二联灭活疫苗及其制备方法和应用。

技术背景

牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea，BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus，BVDV)引起的以发热、黏膜糜烂溃疡、白细胞减少、腹泻、咳嗽及怀孕母牛流产或产出畸形胎儿为主要特征的一种传染病。牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus，BVDV)属于黄病毒科（Flaviviridae），瘟病毒属（Pestivirus）。基因组为单股正链RNA，由一个开放阅读框（ORF）和5’UTR及3’UTR组成。1946年Olafson等首次发现并分离出BVDV。目前，该病在世界上广泛存在。李佑民等于1983年首次从流产胎儿的脾脏中分离到了BVDV，证明该病已在我国存在。近年来从我国多个发病牛场分离到了BVDV，给我国养牛业带来巨大的经济损失。对我国部分省份的牛血清样品进行检测，结果表明，该病在我国呈上升态势。

牛传染性鼻气管炎（Infectious bovine rhinotracheitis，IBR）是由牛疱疹病毒1型病毒（BHV-1）引起的牛的一种急性、热性、接触性传染病，临床表现为上呼吸道及气管黏膜发炎、呼吸困难、流涕等症状，还可引起脓疱性外阴道炎、龟头炎、结膜炎、幼牛脑膜炎、乳房炎、流产等。该病于二十世纪50年代初最早见于美国，目前世界范围内流行。我国于1980年首次从新西兰进口种牛中发现此病，目前在大部分省份的奶牛、黄牛和水牛均有IBRV感染，造成较大的经济损失，疫苗是防控该病的主要措施之一。

商品化的BVD疫苗和IBR疫苗主要为弱毒活疫苗和灭活疫苗，二者各有其优点。弱毒活疫苗能诱导免疫反应快速、免疫期持久和可诱导局部粘膜免疫。灭活疫苗的最大优势在于其安全性，不存在排毒、无流产和持续性感染的风险，在某些情况下可代替弱毒疫苗进行使用，尤其是针对怀孕牛群和经济价值较高的奶牛群。对于这两种传染病，目前我国尚没有商品化疫苗投放市场，养牛业面临巨大的威胁，发生疫情无计可施，在临床病例研究中发现，BVDV和IBRV往往混合感染。因此急需研制一种能够同时预防上述疫病的有效疫苗。本发明提供了一种能同时预防牛传染性鼻气管炎和牛病毒性腹泻的二联灭活疫苗，通过该制品进行免疫接种，可有效保障牛免受BVDV和IBRV的感染，又可“一针两防”，省时、省力、节约成本。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种免疫力高、无免疫干扰的牛病毒性腹泻及牛传染性鼻气管炎的二联灭活疫苗组合物，达到同时预防BVD和IBR的目的。

本发明的目的之二是提供所述的牛病毒性腹泻和牛传染性鼻气管炎的二联灭活疫苗在在制备预防或治疗牛传染性鼻气管炎及牛病毒性腹泻药物中的应用。

本发明的目的之三是提供一种制备牛病毒性腹泻和牛传染性鼻气管炎的二联灭活疫苗组合物的方法。

本发明是一种牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎二联灭活疫苗，其特征在于有效成分包括牛病毒性腹泻Ⅰ型病毒灭活抗原以及牛传染性鼻气管炎病毒灭活抗原。

在本发明中，优选的，所述的牛病毒性腹泻Ⅰ型病毒灭活抗原为灭活的牛病毒性腹泻病毒NM01株，所述的牛传染性鼻气管炎病毒灭活抗原为灭活的牛传染性鼻气管炎病毒LN01/08株，所述牛病毒性腹泻Ⅰ型病毒NM01株，命名为BVDV NM01株，分类命名为牛病毒性腹泻病毒，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所，其菌种保藏编号为：CGMCC No.6032，保藏日期为2012年4月20日；所述牛传染性鼻气管炎病毒LN01/08株，命名为IBRV LN01/08株，分类命名为牛传染性鼻气管炎病毒，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所，其菌种保藏编号为：CGMCC No.6033，保藏日期为2012年4月20日。

本发明所用毒种IBRV LN01/08株是从发病牛鼻拭子经MDBK细胞连续传代并经克隆纯化分离所得，病毒毒价可达10^8.0TCID₅₀/ml以上。

进一步的，本发明还提供了所述的二联灭活疫苗在制备预防或治疗牛传染性鼻气管炎及牛病毒性腹泻中的应用。