[发明专利]一种以二氢杨梅素协同有机酸为原料的新型抑菌剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种新型天然抑菌剂剂的制备方法，特别是以二氢杨梅素为原料开发的高效天然天然抑菌剂，可广泛应用食品防腐领域。

背景技术

全世界农副产品、水产品等食品有很大部分的损失源于微生物引起的腐败变质，而现在市场上大多应用山梨酸钾、苯甲酸钠等化学合成防腐剂防止腐败变质，长期食用这些防腐剂会对人体带来健康隐患。

二氢杨梅素是一种从显齿蛇葡萄植物中提取的黄酮类化合物，具有多种生物活性，有广谱的抑菌效果，对革兰氏阳性、阴性菌霉菌均有抑制作用，而实验证明二氢杨梅素协同有机酸可进一步增强抑菌效果，最低抑菌浓度和最低杀菌浓度较低，这些指标显示了其作为天然食品添加剂的前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种天然的、安全的高效食品抑菌剂，以降低长期食用化学合成的抑菌剂带来的健康隐患。

本发明为解决上述的高效天然抑菌剂的制备方法，其原料组成为：

二氢杨梅素(纯度≥95％)；无水乙醇、乳酸、柠檬酸(均为分析纯级别)；

本发明制备上述高效天然防腐剂的技术方案为：

(1)称取一定量的二氢杨梅素溶解于68％乙醇溶液中，使其质量浓度为5g/L。

(2)在25℃条件下，往二氢杨梅素溶液里依次添加一定量的乳酸、柠檬酸溶液，使乳酸的添加量达到总量的0.08％，柠檬酸的添加量达到总量的0.1％。

(3)25℃下用200rpm摇床充分混匀10分钟，用滤纸过滤弃掉沉淀取滤液，即为所要的高效天然食品抑菌剂；

本发明的天然食品抑菌剂具有广谱抑菌的功效，对各类细菌尤其是沙门氏菌、副溶血性弧菌具有突出的抑菌效果，对霉菌也有显著的抑菌效果。

本发明的优点在于：(1)从天然产物藤茶中提取的二氢杨梅素协同短碳链有机酸乳酸、柠檬酸制备食品防腐剂，在国际上是被认为是一般安全的；(2)二氢杨梅素本身具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、消炎等多种生物活性，而且二氢杨梅素在藤茶中的提取率高最高可达30％左右，易获取；(3)本防腐剂与化学合成的防腐剂如山梨酸钾在同浓度下，其抑菌效果相当；(4)将本发明用于食品的加工储存，不仅成本低，易获得，且抑菌效果显著。

具体实施方式

以下进一步介绍本发明的实施例。

实施例一：高效天然防腐剂的制备

(1)无水乙醇配成68％的乙醇水溶液；

(2)用68％的乙醇水溶液溶解一定质量的二氢杨梅素，使二氢杨梅素质量浓度为5g/L；

(3)在25℃条件下，往二氢杨梅素溶液里依次添加一定量的乳酸、柠檬酸溶液，使乳酸的添加量达到总量的0.08％，柠檬酸的添加量达到总量的0.1％。

(4)25℃下用200rpm摇床充分混匀10分钟，用滤纸过滤弃掉沉淀取滤液，即为所要的高效天然食品抑菌剂；

抑菌剂安全性实验

本抑菌剂的毒性实验主要进行了急性毒性及毒理学安全性评估两项试验。(1)急性毒性：本抑菌的最大用量为40g/Kg，通过对小鼠灌胃本抑菌剂最大量实验，结果表明小鼠使用后均无明显的急性毒理反应，一周内无死亡。(2)毒理学安全性评估：分别以本抑菌剂的低、中、高剂量对小鼠灌胃实验(低剂量为0.2％；中剂量为0.5％；高剂量为1％)，两次/日，对照组按等量的蒸馏水灌胃，两次/日，连续30天，结果表明本防腐剂的各剂量对小鼠血液指标、生化指标没有明显改变，肝肾功能无异常，脂肪、糖类、蛋白质等代谢正常，即对小鼠未出现毒性反应。

抑菌效果

以沙门氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、黄曲霉、青霉为试验菌，用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基和马铃薯琼脂培养基活化菌种；用滤纸片法测定抑菌效果。将培养基分成三组，第一组用本抑菌剂浓度为0.1％浸泡已灭菌干燥的6mm滤纸片；第二组用山梨酸钾浓度为0.1％浸泡已灭菌干燥的6mm滤纸片；第三组用68％乙醇溶液浸泡已灭菌干燥的6mm滤纸片；浸泡6h后，用无菌镊子夹出，贴于含菌平皿中。一个平皿贴3片含样品药液的滤纸片，呈正三角形。将加好药液滤纸片的平皿置恒温培养箱中培养，于37℃培养，细菌培养24h，霉菌48h，取出观察，测定抑菌圈直径，所有数据均重复测试三遍。

本抑菌剂及山梨酸钾对各试验菌的抑菌效果见表1

表1对各试验菌的抑菌效果