[发明专利]一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法

权利要求书

1.一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

(1)将铁皮石斛蒴果顶部用刀片切割一小部分，用清水清洗一遍表面，放置于组培瓶中，然后在无菌操作台中用酒精浸泡30s，接着用氯化汞水溶液浸泡10min，再用无菌水反复漂洗3～5次，即可完成消毒步骤；

(2)将步骤(1)得到铁皮石斛种子在无菌环境中将其放置于无菌的铝片上，用手术刀切开，将其播种于种子培养基中，在25±3℃、湿度≤60％、光照强度1000Lux-1500Lux、光照时间为8h/d的培养室中培养，培养2个月后种子萌发形成原球茎并进一步形成小芽；其中，上述的种子培养基组成为：+6-卡基嘌呤0.2mg/L～0.25mg/L+萘乙酸0.05mg/L～0.1mg/L+白糖20g/L+土豆200g/L+琼脂5.1g/L；

(3)将步骤(2)得到的铁皮石斛小芽转接于继代培养基中，在25±3℃、湿度≤60％、光照强度3000Lux-3500Lux、光照时间为11h/d的培养室中培养，3个月后小芽变成具有2～3片真叶并带有1～2条幼根的小苗；其中，上述中继代培养基组成为：N6+6-卡基嘌呤2mg/L～2.5mg/L+萘乙酸0.5mg/L～1mg/L+白糖20g/L+土豆200g/L+琼脂5.1g/L；

(4)将步骤(3)中得到的小苗转移到一步成苗培养基中，在25±3℃、湿度≤60％、光照强度3000Lux-3500Lux、光照时间为12h/d的培养室中培养，4个月后小苗变成具有2～3条根、4片叶片、株高≥2.5cm、茎粗≥0.2cm的商品组培苗；其中，上述中一步成苗培养基组成为：改良的N6+6-卡基嘌呤0.5mg/L～1mg/L+萘乙酸1mg/L～1.5mg/L+白糖20g/L+土豆200g/L+琼脂5.1g/L；

(5)将步骤(4)得到的生根苗从组培瓶内取出用清水清洗取出培养基后，用高锰酸钾泡根5min后，摊开晾干至根部发白，然后移栽至大棚内苗床上的基质中，培养20～24个月后即可采收。

2.根据权利要求1所述的一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的酒精体积浓度为75％。

3.根据权利要求1所述的一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的氯化钙水溶液浓度为0.1％。

4.根据权利要求1所述的一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法，其特征在于，步骤(5)所述的高锰酸钾浓度为0.3％。

5.根据权利要求1所述的一种高效快速繁殖铁皮石斛组培苗的方法，其特征在于，步骤(5)所述苗床基质组成为：松树皮+花生壳按体积3∶1比例进行混合；其中，松树皮直径为1～1.5cm，花生壳直径为0.8～1cm。