[发明专利]一种前白蛋白纳米抗体、其编码序列及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学或生物制药技术领域，涉及一种针对于前白蛋白的纳米抗体。 

背景技术

前白蛋白(Prealbumin,PA)，分子量5.4万，由肝细胞合成，在电泳分离时，常显示在白蛋白的前方，其半衰期很短，仅约12小时。因此，测定其在血浆中的浓度对于了解蛋白质的营养不良、肝功能不全、比之白蛋白和转铁蛋白具有更高的敏感性；除了作为一种灵敏的营养蛋白质指标，PA在急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化或肾炎时其血浓度下降。与此同时，目前市场上用于检测前白蛋白的试剂盒的工作原理主要通过一种针对于前白蛋白的抗体来实现的，但是这种传统意义上的抗体稳定性差、灵敏度低、生产成本高，所有因素均限制了对于前白蛋白的检测。1993年比利时科学家首次在Nature报道：在骆驼血液中的抗体，有一半没有轻链，而且更让人惊喜的是，这些缺失轻链的“重链抗体”能像正常抗体一样与抗原等靶标紧密结合，另外不像scFv那样互相沾粘，甚至聚集成块。这种抗体只包含一个重链可变区和两个常规的CH2与CH3区，更重要的是单独克隆并表达出来的VHH区具有很好的结构稳定性与抗原结合活性，纳米抗体技术，是生物医学科学家在传统抗体的基础上，运用分子生物学技术结合纳米粒子科学的概念，进行的抗体工程革命，而研发的最新和最小的抗体分子，分子量只是普通抗体的1/10，所以VHH也称Nanobody（纳米抗体）；与此同时纳米抗体化学性质也更加灵活，稳定性好，可溶性高，表达容易且容易获得，容易偶联其他分子，因此应用纳米抗体技术研发前白蛋白检测试剂具有广阔的前景。 

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是提供一种针对前白蛋白表位的纳米抗体，同时提供该纳米抗体的编码序列及该纳米抗体在制备检测的应用。 

技术方案：为实现上述目的，本发明的第一方面，提供了一种前白蛋白的纳米抗体的VHH链，包括框架区FR和互补决定区CDR，所述框架区FR选自下组的FR的氨基酸序列：SEQ ID NO：1所示的FR1，SEQ ID NO：2所示的FR2，SEQ ID NO：3所示的FR3，SEQ ID NO：4所示的FR4；或SEQ ID NO：5所示的FR1，SEQ ID NO：6所示的FR2，SEQ ID NO：7所示的FR3，SEQ ID NO：4所示的FR4； 

或SEQ ID NO：8所示的FR1，SEQ ID NO：9所示的FR2，SEQ ID NO：10所示的FR3，SEQ ID NO：11所示的FR4；或SEQ ID NO：12所示的FR1，SEQ ID NO：13所示的FR2，SEQ ID NO：14所示的FR3，SEQ ID NO：15所示的FR4；或SEQ ID NO：8所示的FR1，SEQ ID NO：16所示的FR2，SEQ ID NO：17所示的FR3，SEQ ID NO：11所示的FR4；或SEQ ID NO：18所示的FR1，SEQ ID NO：19所示的FR2，SEQ ID NO：20所示的FR3，SEQ ID NO：11所示的FR4；或SEQ ID NO：8所示的FR1，SEQ ID NO：21所示的FR2，SEQ ID NO：22所示的FR3，SEQ ID NO：11所示的FR4； 

所述互补决定区CDR选自下组的CDR的氨基酸序列： 

SEQ ID NO：23所示的CDR1，SEQ ID NO：24所示的CDR2，SEQ ID NO：25所示的CDR3；或SEQ ID NO：26所示的CDR1，SEQ ID NO：27所示的CDR2，SEQ ID NO：28所示的CDR3；或SEQ ID NO：29所示的CDR1，SEQ ID NO：30所示的CDR2，SEQ ID NO：31所示的CDR3；或SEQ ID NO：32所示的CDR1，SEQ ID NO：33所示的CDR2，SEQ ID NO：34所示的CDR3；或SEQ ID NO：35所示的CDR1，SEQ ID NO：36所示的CDR2，SEQ ID NO：37所示的CDR3；或SEQ ID NO：38所示的CDR1，SEQ ID NO：39所示的CDR2，SEQ ID NO：40所示的CDR3；或SEQ ID NO：41所示的CDR1，SEQ ID NO：42所示的CDR2，SEQ ID NO：43所示的CDR3。