[发明专利]一种叶下珠斯泰丁A的制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于中药有效成分提取技术领域，涉及一种叶下珠斯泰丁A的制备工艺。

背景技术

叶下珠斯泰丁A（Phyllanthostatin A）为木脂素类化合物，分子式为C₂₉H₃₀O₁₃，分子量为586.55，为无定性固体，mp.127-130℃。叶下珠斯泰丁A主要来源于大戟科植物渐尖叶下珠Phyllanthus acuminatus Vahl.的根。药理学研究表明，叶下珠斯泰丁具有细胞抑制活性，体外抑制PS白血病细胞生长，ED₅₀为4μg/mL。

目前对叶下珠斯泰丁A的研究较少，因此提供一种叶下珠斯泰丁A的制备工艺对含有叶下珠斯泰丁A的药材资源开发及药理研究具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种叶下珠斯泰丁A的制备工艺。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种叶下珠斯泰丁A的制备工艺，其特征在于包括以下步骤：取渐尖叶下珠的干燥根，粉碎至40目，投入萃取釜，通入液态CO₂和夹带剂进行超临界萃取，获得萃取物，将萃取物用乙醚萃取多次，所得萃取液浓缩后得乙醚浸膏，乙醚浸膏通过硅胶柱层析，正己烷-乙酸乙酯梯度洗脱，洗脱液旋转蒸发浓缩，干燥即得叶下珠斯泰丁A产品。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为38~55℃、压力为25~32MPa、时间为2~3h，CO₂流量为18~26L/h，以95%乙醇为夹带剂，夹带剂的用量为原料量的15~30%，解析温度30~40℃、压力8~9MPa。

所述硅胶柱径高比为1:10-15，正己烷-乙酸乙酯混合溶剂按体积比1:1、1:5、1:8进行梯度洗脱。

本发明的优势在于：本发明采用超临界CO₂萃取，清洁无污染，硅胶柱层析，分离效率高，可提高产品纯度。

具体实施方式：

实施例1：

将渐尖叶下珠的干燥根粉碎，过40目筛，取5kg投入萃取釜中，通入处于超临界状态的CO₂进行萃取，设定萃取釜参数：萃取温度38℃，压力为25MPa，通入CO₂流量为18L/h，待萃取罐内环境稳定后，通入1500ml95%乙醇作为夹带剂参与萃取，萃取2h后，解析，解析温度35℃、压力8.5MPa，从分离釜中收集萃取物，将萃取物用乙醚反复萃取4次，合并乙醚萃取液，浓缩后得到乙醚浸膏。将乙醚浸膏与适量硅胶混合拌匀，用浸膏5倍量的硅胶装柱（柱径高比1:10），将拌样硅胶置于柱顶，用正己烷-乙酸乙酯按体积比1:1、1:5、1:8进行梯度洗脱，薄层跟踪监测，收集叶下珠斯泰丁A的流分，旋转蒸发浓缩、干燥即得叶下珠斯泰丁A产品，HPLC检测，纯度为62.3%。

实施例2：

将渐尖叶下珠的干燥根粉碎，过40目筛，取5kg投入萃取釜中，通入处于超临界状态的CO₂进行萃取，设定萃取釜参数：萃取温度45℃，压力为28MPa，通入CO₂流量为20L/h，待萃取罐内环境稳定后，通入750ml95%乙醇作为夹带剂参与萃取，萃取3h后，解析，解析温度35℃、压力8.5MPa，从分离釜中收集萃取物，将萃取物用乙醚反复萃取5次，合并乙醚萃取液，浓缩后得到乙醚浸膏。将乙醚浸膏与适量硅胶混合拌匀，用浸膏4倍量的硅胶装柱（柱径高比1:8），将拌样硅胶置于柱顶，用正己烷-乙酸乙酯按体积比1:1、1:5、1:8进行梯度洗脱，薄层跟踪监测，收集叶下珠斯泰丁A的流分，旋转蒸发浓缩、干燥即得叶下珠斯泰丁A产品，HPLC检测，纯度为67.9%。

实施例3：