[发明专利]一种制备苍毛金发藓素A的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种制备苍毛金发藓素A的方法。

背景技术

苍毛金发藓素A（Pallidisetin A），分子式为C₂₃H₁₈O₃，分子量为342.39，为无色片状结晶，mp.233℃。主要存在于金发藓科(Polytrichaceae) 苍毛金发藓Polytrichum pallidisetum Funoh.中。药理学研究表明，苍毛金发藓素A具有细胞毒活性。对人黑色素癌细胞RPMI-7951和多形恶性胶质瘤U-251MG的ED50皆为1.0μg/mL。

目前对苍毛金发藓素A的研究较少，因此提供一种苍毛金发藓素A的制备方法对含有苍毛金发藓素A的苍毛金发藓药材资源开发及药理研究具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、制备量大、纯度高，适合工业化生产的制备苍毛金发藓素A的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种制备苍毛金发藓素A的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）提取：取富含苍毛金发藓素A的苍毛金发藓药材粉碎，加入乙醇溶液，采用超高压法进行提取，控制粒径为60目，乙醇浓度为75-95%，固液体积比为1:10-1:18，压力为400MPa，保压3-5min，重复2-3次，合并提取液，浓缩成浸膏；

（2）萃取：将上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液进行浓缩得浸膏；

（3）柱层析：将上述浸膏用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液；

（4）制备液相纯化：将石油醚-丙酮（3:1）洗脱液浓缩干燥，用制备液相色谱分离纯化，流速为20-50ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水（20:35:45）。

所述步骤（3）中，氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-7.5bar，柱径高比为1:7-12。

本发明的有益效果是：采用本发明方法，操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取苍毛金发藓药材粉碎，控制粒径为60目，称取500g，以固液体积比为1:10加入85%乙醇溶液，采用超高压法进行提取，提取压力为400MPa，保压时间为3.5min，重复3次，合并提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100目的中性氧化镁低压柱（柱压为6bar，柱径高比为1:7），用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮（3:1）洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为20ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水（20:35:45），紫外检测器在线监测，针对性收集苍毛金发藓素A的流分溶液，减压回收试剂得苍毛金发藓素A，含量为96.7%。

实施例2：

取苍毛金发藓药材粉碎，控制粒径为60目，称取500g，以固液体积比为1:18加入85%乙醇溶液，采用超高压法进行提取，提取压力为400MPa，保压时间为5min，重复3次，合并提取液，减压浓缩得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，浓缩得萃取浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至200目的中性氧化镁低压柱（柱压为5bar，柱径高比为1:12），用石油醚-丙酮按体积比20:1-3:1进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液，将石油醚-丙酮（3:1）洗脱液浓缩、干燥，得粗品。将粗品用制备高效液相色谱分离纯化，流速为40ml/min，流动相为甲醇-乙腈-水（20:35:45），紫外检测器在线监测，针对性收集苍毛金发藓素A的流分溶液，减压回收试剂得苍毛金发藓素A，含量为95.5%。

实施例3：