[发明专利]满天星异荭草苷在制备治疗酒精性肝损伤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及中药满天星提取物的用途，具体地说是以满天星异荭草苷为原料在制备治疗酒精性肝损伤药物中的应用。

背景技术

酗酒引起的酒精性肝损伤是酒精性肝病向肝硬化发展的重要的病理过程，许多研究证实其尚可逆行，因此有效治疗酒精性肝损伤既是治疗酒精性肝病的良好契机，又是阻断或延缓慢性酒精性肝病向肝硬化发展的关键。目前，临床对酒精性肝损伤的治疗仍没有明确的方案和有效治疗药物。近些年来，国内外大量研究表明天然药物和中药在治疗酒精性肝损伤方面显示出了可靠疗效和较少不良反应的特点。因此采用现代化技术从天然药物和中药中开发治疗酒精性肝损伤的新药具有重要意义。

满天星（Gypsophila elegans Bieb），又名丝石竹、霞草等，是石竹科石头花属植物^[1]，是广西壮民族地区抗肝脏疾病习用草药，其主要活性成分之一满天星异荭草苷（isoorientin-2″-O-α-L-arabinopyranosyl，IOA）对酒精诱导的肝损伤的作用尚无报道。

发明内容

本发明的目的是研究开发中药满天星的新用途。

本发明是基于发明人的实验研究而完成的。研究分两大部分：

满天星异荭草苷的制备；

满天星异荭草苷在制备治疗酒精性肝损伤药物中的应用。

一、满天星异荭草苷的制备

提取方法：干燥的满天星10kg粉碎后，用80L的75%乙醇回流提取3次，合并3次乙醇提取液，回收乙醇，得到乙醇提取物315.7g。乙醇提取物加入630ml蒸馏水摇匀成悬浮液，接着分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，萃取方法简述如下：首先，用630ml石油醚萃取，弃石油醚液；接着，用630ml乙酸乙酯萃取，弃乙酸乙酯液；最后，用630ml正丁醇萃取，回收正丁醇，得正丁醇萃取物177.6g。

纯化方法：正丁醇萃取物上D101型大孔树脂，先用5倍量水洗脱后，再用10倍量90%的甲醇洗脱，回收甲醇，得粗提物。将粗提物溶于甲醇，与等量硅胶拌样，上样于硅胶柱，以甲醇-乙酸乙脂-水不同比例即3：3：2；4：3：2；5：3：2；6：3：2；7：3：2；8：3：2；9：3：2；10：3：2，进行梯度洗脱。薄层色谱跟踪，合并相似馏分。合并用比例为4：3：2；5：3：2；6：3：2；7：3：2的甲醇-乙酸乙脂-水洗脱的馏分，再经3次硅胶柱层析后再次合并相似馏分，回收洗脱剂，得淡棕色结晶28.3mg。

二、满天星异荭草苷治疗酒精性肝损伤药效学实验

将Wistar雄性大鼠以白酒诱导形成酒精性肝损伤动物模型，观察满天星异荭草苷治疗酒精性肝损伤的作用。结果表明满天星异荭草苷能明显降低丙氨酸转氨酶（ALT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST），碱性磷酸酶（ALP），谷酰转肽酶（GGT），白细胞介素-6（IL-6），人肿瘤坏死因子-α（TNF-α），肝组织髓过氧化物酶（MPO）和丙二醛（MDA）的水平，显著提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，提示满天星异荭草苷具有抗脂质过氧化反应的作用；此外，满天星异荭草苷可明显降低透明质酸（HA），层粘连蛋白（LN），Ⅲ型胶原（PCIII）和羟基脯氨酸（HYP）的含量，说明满天星异荭草苷具有抑制胶原沉积的作用。

通过病理学检查显示，正常组大鼠肝小叶结构清晰，肝血窦与肝板之间界限清楚，肝细胞核大而圆，位于细胞的中央。模型组大鼠肝细胞出现肿胀、气球样变，胞浆染色不均，或胞浆内出现大量大小不等的脂防空泡，或肝局灶性坏死和淋巴细胞浸润现象；满天星异荭草苷组大鼠肝病理改变比模型模型组轻。

采用流式细胞术检测肝细胞的凋亡情况，RT-PCR检查bcl-2mRNA的表达，Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达，结果表明，与模型组比较，满天星异荭草苷治疗组肝细胞凋亡更明显，满天星异荭草苷可明显抑制bcl-2mRNA、α-SMA蛋白、TGF-β1蛋白的表达。

总之，本发明首次对满天星异荭草苷治疗酒精性肝损伤进行了研究，实验表明，满天星异荭草苷可作用于酒精性肝损伤的多个环节或多个靶点，可有效的抑制脂质过氧化反应、减轻肝组织病理损伤、抑制胶原沉积、促进肝星状细胞凋亡，使肝损伤明显减轻，对防治肝损伤具有独特优势。满天星异荭草苷对酒精引起的肝损伤具有明显抑制作用，是治疗酒精性肝损伤的一种非常有潜在价值的新药。

具体实施方式

一、满天星异荭草苷的制备