[发明专利]一种CRISP1在医疗器械中的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋白的新用途，具体地说，是关于一种CRISP1在医疗器械中的新用途。

背景技术

颊癌通常系指发生于颊粘膜癌。发生于颊部皮肤者习惯性地归属于颜面部皮肤癌。颊癌早期一般无明显疼痛, 致使患者往往延误就医, 当癌肿浸润肌肉等深层组织或合并感染时, 出现明显疼痛, 伴不同程度的张口受限, 直至牙关紧闭。牙周围组织受累后, 可出现牙痛或牙松动。由于癌瘤浸润溃疡形成, 特别是伴发感染时, 可引起局部继发性出血, 疼痛加重。患者常有颌下淋巴结增大。淋巴结增大可能由于癌瘤转移, 也可能系感染所致。由于颊癌呈浸润性生长, 局部复发率高, 除浸润表浅的局限性小范围颊黏膜癌可考虑采用单纯的冷冻及放射治疗外, 对中晚期患者, 目前多主张采用以手术为主的综合治疗。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种富含半胱氨酸分泌蛋白1在制备诊断颊癌的医疗器械中的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种富含半胱氨酸分泌蛋白1在制备诊断颊癌的医疗器械中的应用，所述的医疗器械是诊断试纸或试剂盒，所述的医疗器械的诊断样品是唾液。

所述的医疗器械的诊断阙值是唾液富含半胱氨酸分泌蛋白1浓度10-40ng/ml。

本发明优点在于：提供了富含半胱氨酸分泌蛋白1的新用途，为颊癌的大规模人群筛查、颊癌术后病人的自我检测提供方便、可靠、无创、价廉的方法，指导颊癌的治疗；本发明的试纸检测快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简便、无需任何仪器设备，而且结果判断直观可靠、易于掌握，同时也方便病人对病情自我监测。

附图说明

附图1是颊癌的CRISP1诊断试纸的结构示意图。

附图2是颊癌的CRISP1诊断试纸的检测结果示意图。

附图3是颊癌的CRISP1诊断试纸的检测过程示意图。

具体实施方式

下面对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1

下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

附图中涉及的附图标记和组成部分如下所示：

1.底板           2.样品垫

3.金胶垫         4.硝酸纤维膜层

5.吸水纸层       6.唾液

7.层析方向

实施例1免疫组化

实验材料：正常颊组织、颊癌组织；一抗为羊抗人CRISP1抗体，二抗驴抗羊Dylight594抗体。

实验方法：

组织芯片就是将大量组织样品有序地组合在一个微小基片表面,借助免疫组织化学的方法进行检测。

1、将组织用PFA固定液固定5分钟，PBS洗10分钟

2、抗原修复：用0.01M柠檬酸盐溶液暴露抗原决定族。微波炉高火3分钟加热修复液至沸腾（4分钟），再连续低火微波1分钟、两次。冷却至室温，PBS洗10分钟。用0.5%的Triton破膜10分钟。

3、封闭非特异性蛋白

1)  PBS 浸泡3分钟×3次

2)  3% H₂O₂-甲醇（30% H₂O₂10ml+甲醇90ml）室温浸泡30分钟

3)  自来水冲洗10分钟，PBS 浸泡3分钟×3次，甩干或纸巾吸去多余液体（勿碰到组织），用组化笔在组织周围画上圈（蒸馏水冲洗时间内配好10%封闭血清）

4)  在圆圈内组织内迅速滴入5% BSA（用PBS配制），封闭非特异性抗原（勿让组织干燥，应在纸巾吸掉水后立即加入），室温30分钟（配好一抗），扣掉封闭液，不洗。

4、一抗孵育

甩去切片上的BSA,用滤纸擦干组织周围残留BSA，直接加入已稀释的羊抗人CRISP1抗体（约60μl），放入湿盒中4℃过夜。第二天从冰箱中取出需37 ℃复温30 min。

5、二抗孵育

1)  将一抗洗掉，将玻片插入塑料玻片架，然后整个放入塑料盒中，加PBS浸泡放于微型振荡器上洗10分钟。

2)  用滤纸将圆圈周围的水吸去，加入二抗驴抗羊Dylight594抗体，室温30分钟。

3)  加PBS浸泡放于微型振荡器上洗10分钟。

6、封片

纸巾吸除多余液体，在玻片上滴管滴加DAPI封片液一滴，然后盖上盖玻片，用镊子轻轻挤压，并赶走气泡，室温放置1小时。观察。