[发明专利]一种从海风藤叶中制备细叶青蒌藤素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天生物技术领域，特别是涉及一种从海风藤叶中制备细叶青蒌藤素的方法。

背景技术

细叶青蒌藤素，分子式C₁₈H₁₈O₈，分子量362.33，CAS号20421 -13-0，分子结构式

I                                                。

海风藤为胡椒科植物细叶青蒌藤，茎、叶含细叶青蒌藤素、细叶青蒌藤烯酮、细叶青蒌藤醌醇、细叶青蒌藤酰胺，其中细叶青蒌藤素含量最高，并且有阻抑肿瘤的作用。

通过检索，细叶青蒌藤素制备方法多采用硅胶柱分或制备液相分离得到，如文献“海风藤乙酸乙酯部位及挥发油部位成分的研究”。现有工艺操作繁琐，样品收率较低，不适合批量生产。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种从海风藤叶中制备细叶青蒌藤素的方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的：

一种从海风藤叶中制备细叶青蒌藤素的方法，其特征在于以下步骤：

A取海风藤叶粉碎，用5-10倍量40-90%乙醇溶液微波萃取2-3次，每次超声10-20分钟，萃取液回收乙醇后加入大孔树脂中吸附，用70-90%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩得浓缩液；

B上述浓缩液用乙酸乙酯萃取，萃取液过氧化铝柱，下柱液回收试剂采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得细叶青蒌藤素。

步骤A中所述的大孔树脂可选非极性大孔树脂和弱极性大孔树脂中的一种。

步骤B中所述的氧化铝为100-200目的中性氧化铝或酸性氧化铝。

步骤B中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选氯仿、甲醇、水溶剂系统，混合比例5-15:4-9: 3-8，取上相做固定相，下相做流动相。

本方法的优点在于采用大孔树脂富集和高速逆流色谱分离相结合，整个工艺操作简单，产品收率高，而且易实现工业化生产。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取5kg海风藤叶粉碎，用6倍量60%乙醇溶液微波萃取3次，每次超声10分钟，萃取液回收乙醇后加入D101大孔树脂中吸附，用5倍柱体积75%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩至密度1.03，再用乙酸乙酯萃取，萃取液过中性氧化铝（粒度120目）柱，下柱液回收试剂得浸膏。取氯仿、甲醇、水，按比例6:5:5混合，充分分层后，取上相做固定相注满高速逆流色谱管，转动主机800rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为2ml/min，流动相溶解浓缩液，进样，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得细叶青蒌藤素1.8g，含量97.2%。

实施例2：

取5kg海风藤叶粉碎，用7倍量70%乙醇溶液微波萃取2次，每次超声15分钟，萃取液回收乙醇后加入HZ816大孔树脂中吸附，用4倍柱体积80%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩至密度1.02，再用乙酸乙酯萃取，萃取液过酸性氧化铝（粒度180目）柱，下柱液回收试剂得浸膏。取氯仿、甲醇、水，按比例15:9:8混合，充分分层后，取上相做固定相注满高速逆流色谱管，转动主机900rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为3ml/min，流动相溶解浓缩液，进样，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得细叶青蒌藤素1.5g，含量98.1%。

实施例3：

取5kg海风藤叶粉碎，用4倍量90%乙醇溶液微波萃取3次，每次超声10分钟，萃取液回收乙醇后加入AB-8大孔树脂中吸附，用6倍柱体积70%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩至密度1.01，再用乙酸乙酯萃取，萃取液过中性氧化铝（粒度120目）柱，下柱液回收试剂得浸膏。取氯仿、甲醇、水，按比例9:7:6混合，充分分层后，取上相做固定相注满高速逆流色谱管，转动主机850rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为2ml/min，流动相溶解浓缩液，进样，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得细叶青蒌藤素1.8g，含量97.2%。

实施例4：

取5kg海风藤叶粉碎，用6倍量70%乙醇溶液微波萃取3次，每次超声10分钟，萃取液回收乙醇后加入HPD100大孔树脂中吸附，用5倍柱体积70%乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩至密度1.02，再用乙酸乙酯萃取，萃取液过中性氧化铝（粒度120目）柱，下柱液回收试剂得浸膏。取氯仿、甲醇、水，按比例8:6:5混合，充分分层后，取上相做固定相注满高速逆流色谱管，转动主机800rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为2ml/min，流动相溶解浓缩液，进样，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得细叶青蒌藤素1.5g，含量95.1%。