[发明专利]产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法无效
| 申请号： | 201310192348.0 | 申请日： | 2013-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN103243052A | 公开（公告）日： | 2013-08-14 |
| 发明（设计）人： | 陈山;浦媛媛;邹青松;王晓;王清;刘玫;张义平;姚晓麦;黄磊 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530004 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 右旋糖酐 蔗糖 优良 菌种 选育 方法 | ||
1.一种产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）肠膜明串珠菌的葡萄糖耐受性培养；
（2）肠膜明串珠菌的复壮培养；
（3）肠膜明串珠菌的产酶培养。
2.根据权利要求1所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于：所述葡萄糖耐受性培养是原始肠膜明串珠菌取种，接种于以葡萄糖为唯一碳源的培养基中培养48～60h。
3.根据权利要求2所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于葡萄糖耐受性培养的培养基配方为：葡萄糖100～120g/L，KH2PO40.3～0.35g/L，Na2HPO41.4～1.5g/L，蛋白胨1.5～2g/L，酵母膏8～10g/L，琼脂16～20g/L，蒸馏水1L，pH7.0～7.2。
4.根据权利要求1所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于：所述复壮培养是选取耐受性培养后茁壮的单菌落接种于43号培养基进行培养24～48h。
5.根据权利要求4所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于复壮培养的培养基配方为：蔗糖130g/L，KH2PO40.3g/L，Na2HPO41.4g/L，蛋白胨2g/L，琼脂20g/L，蒸馏水1L，pH7.0～7.2。
6.根据权利要求1所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于：所述产酶培养经历种子培养基培养和产酶培养基培养两个阶段；选取复壮培养后茁壮的单菌落接种于种子培养基，待菌种繁殖至对数期时，以2%v/v的接种量接种于产酶培养基，培养21～25h后对培养液以12000r/min、4℃、30min的条件进行离心去除菌体，收集上清液即为右旋糖酐蔗糖酶酶液。
7.根据权利要求6所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于种子培养基的配方为：蔗糖50～60g/L，KH2PO40.3～0.35g/L，Na2HPO41.4～1.5g/L，蛋白胨2～2.5g/L，酵母膏8～10g/L，蒸馏水1L，pH6.8～7.0；产酶培养基的配方为：蔗糖50～60g/L，KH2PO40.3～0.35g/L，Na2HPO41.4～1.5g/L，蛋白胨1.5～2g/L，酵母膏8～10g/L，牛肉膏8～10g/L，蒸馏水1L，pH6.8～7.0。
8.根据权利要求1至7任一所述的产右旋糖酐蔗糖酶优良菌种的选育方法，其特征在于：固体培养基培养菌种的条件为25±3℃；液体培养基培养菌种的条件为25±3℃、150±50r/min，装液量为所盛容器标准容量的20%。
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