[发明专利]一种天然具孔皮肤补片及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种天然具孔皮肤补片及其制备方法。

背景技术

国内进行皮肤修补主要有两种方法，即植皮和用胶原蛋白海绵修补。植皮虽是“同种移植”，但是会造成二次创伤，并且真皮组织再生困难，会留下明显瘢痕。胶原蛋白海绵，是以动物组织为原料通过酶解、纯化制取高纯型胶原，再根据互贯网络技术制成。胶原海绵虽然保留了蛋白质的三股螺旋结构，但是去除了膜组织的天然空间结构，不利于皮肤组织再生和修复，且胶原海绵降解速度快、不能做到和组织再生同步。

皮肤修复手术通常创面较大，术后创面与修复材料间易积液造成修复效果不理想，现有的解决方法是对修复材料进行打孔处理。就目前已有的打孔方式，无论是贯穿孔还是半贯穿孔，都存在术后瘢痕甚至异色斑点的现象，影响患者生活质量。毛发、汗腺等皮下组织难于再生也是一大问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种天然具孔皮肤补片及其制备方法。

本发明提供的制备皮肤补片（天然具孔皮肤补片）的方法，包括如下步骤：

（1）取离体的猪皮或牛皮，去除外表层的鬃毛后由表皮层向真皮层切除0.2-1.0mm（如0.2-0.7mm、0.3-1.0mm、0.5±0.2mm、0.4±0.2mm或0.8±0.2mm）厚度，然后取0.5-2.0mm（如0.5-1.2mm、0.8-2.0mm、1.0±0.2mm、0.7±0.2mm或1.8±0.2mm）厚度的真皮及皮下组织层；

（2）使用碱溶液浸泡处理步骤（1）的产物；

（3）使用表面活性剂溶液浸泡处理步骤（2）的产物；

（4）使用碱溶液浸泡处理步骤（3）的产物；

（5）使用PBS缓冲液浸泡处理步骤（4）的产物；

（6）使用pH5.8-7.2（如pH5.8-6.5、pH6.5-7.2、pH5.8、pH6.5或pH7.2）的辐照保护试剂溶液浸泡处理步骤（5）的产物；

（7）将步骤（6）的产物依次进行冷冻干燥和辐照灭菌，得到皮肤补片。

所述步骤（2）又称脱细胞处理。所述步骤（2）中：所述碱溶液可为碱性化合物溶液。所述碱性化合物可为NaOH或KOH。所述碱性化合物溶液中，所述碱性化合物的浓度可为0.5-4M（如0.5-0.8M、0.8-4M、0.5M、0.8M或4M）。所述步骤（2）中：所述浸泡处理的条件可为：0-25℃（如0-7℃、3-25℃、2±2℃、5±2℃或23±2℃）、1-2.5小时（如1-1.5小时、1.5-2.5小时、1小时、1.5小时或2.5小时）。所述碱溶液具体可为碱性化合物的水溶液。

所述步骤（3）又称脱脂处理。所述步骤（3）中：所述表面活性剂为非离子型表面活性剂，要求残留可控、无细胞毒性或低细胞毒性、不会污染环境。所述步骤（3）中：所述表面活性剂可为TritonX-100。所述表面活性剂溶液中，表面活性剂的浓度可为0.5-3g/100ml（如0.5-0.8g/100ml、0.8g-3g/100ml、0.5g/100ml、0.8g/100ml或3g/100ml）。所述步骤（3）中：所述浸泡处理的条件可为：8-28℃（如8-18℃、14-28℃、10±2℃、16±2℃或26±2℃）、16-18小时（如16-17小时、17-18小时、16小时、17小时或18小时）。所述表面活性剂溶液具体可为表面活性剂水溶液。

所述步骤（4）中：所述碱溶液可为碱性化合物溶液。所述碱性化合物可为NaOH或KOH。所述碱性化合物溶液中，所述碱性化合物的浓度可为1.5-10M（如1.5-3M、3-10M、1.5M、3M或10M）。所述步骤（4）中：所述浸泡处理的条件可为：0-10℃（如0-7℃、3-10℃、2±2℃、5±2℃或8±2℃）、15-60分钟（如15-30分钟、30-60分钟、15分钟、30分钟或60分钟）。所述碱溶液具体可为碱性化合物的水溶液。

所述步骤（5）中：所述PBS缓冲液的pH可为5.8-7.2（如5.8-6.0、6.0-7.2、5.8、pH6.0或7.2）。所述步骤（5）中：所述浸泡处理的条件可为：8-28℃（如8-20℃、16-28℃、10±2℃、18±2℃或26±2℃）、10-18小时（如10-16小时、16-18小时、10小时、16小时或18小时）。