[发明专利]一种链霉菌及其在冬枣轮纹病防治中的应用

说明书

【技术领域】本发明属于生物技术和农业病害防治技术领域，具体地说，它涉及一种链霉菌Streptomyces sp.及其在防治冬枣轮纹病中的应用。

【背景技术】冬枣口感鲜嫩多汁，风味酸甜适口，是鲜食品种中的佼佼者，自推广种植以来给广大种植户带来了巨大的经济利益，但是随着栽培面积的迅速增加，冬枣病害的发生愈来愈重，其中冬枣轮纹病是较为常见和危害严重的真菌病害，冬枣轮纹病不仅直接造成冬枣产量下降与品质降低，而且病原真菌可分泌产生对人畜有害的毒素与代谢物，对人们的健康构成极大威胁。目前，冬枣轮纹病的防治主要是通过喷洒化学药物来防治，但长期不合理使用化学农药产生了诸多问题。如：化学农药的高毒、高残留对人、畜的健康造成了危害，对土壤、水体、大气造成了严重污染，破坏了生态平衡；病原菌药性的不断增强，农药的使用量和使用频度不断加大，出现了用药量与病害相互递增的恶性循环。因此开发对人类和环境友好、并具良好防治效果的、新的植物病害防治办法迫在眉睫。

随着人们对食品安全的日益重视，可持续控制病虫害发展的需要，生物防治受到各国政府和植物保护专家的重视。生物防治以生态学为基础来控制有害生物，是综合防治体系中一个必不可缺少的组成部分。它避免了化学农药使用带来的一系列植保、环境和能源方面的问题，避免了农药残留对人畜的危害。应用生物农药取代化学农药已逐渐成为一种趋势。 

放线菌是一类具有重要经济价值的微生物资源，是抗生素、酶制剂和免疫调节剂等多种生物活性物质的主要生产者，目前农业和临床使用的抗生素有四分之三是由放线菌生产的。可以说放线菌为人类健康做出了巨大贡献。然而，随着放线菌研究工作的广泛开展，新放线菌的发现越来越难，大量放线菌和活性产物被多次重复发现和描述。现在要从普通生态环境中发现新的放线菌越来越困难。一些学者建议从海洋、动植物内生环境、原始森林、盐湖、极地等特殊生态环境采样，这些生态环境，由于经过长期自然选择，微生物生态多样性特殊，发现新放线菌的可能性更大因为这些环境经过千百万年的自然进化，微生物生态多样性特殊，存在新菌种几率大。新微生物菌种意味着新基因、新代谢途径的存在，获得新结构次级代谢产物的可能性也大。 

贝壳堤是由生活在潮间带的贝类死亡之后的壳体及碎屑，经波浪搬运，在高潮线附近堆积而成的。黄河三角洲滨州市无棣、沾化海岸近五六千年以来成陆过程中形成的贝壳堤，生态环境独特，与美国易斯安娜州和南美苏里南的贝壳堤并称为世界三大古贝壳堤。而且是世界上规模最大、惟一的新老并存的贝壳堤。贝壳堤独特的生态环境赋予了该地区特有的生物资源，为发掘新的放线菌和开发生物农药提供了良好的资源。加快生物农药的研发和应用， 符合我国农业发展的需要，对于保障人们的饮食健康具有重要意义，发展前景广阔。 

【发明内容】本发明的目的在于针对冬枣轮纹病日益严重的问题，提供一种链霉菌（Streptomyces sp.）BK和该菌在冬枣轮纹病防治中的应用。

本发明提供的链霉菌（Streptomyces sp.）BK菌株，于2013年04月19日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”（北京市朝阳区北辰西路1号院，中科院微生物研究所），其保藏号为CGMCC No.7489。 

链霉菌Streptomyces sp.BK CGMCC No.7489的筛选 

取黄河三角洲贝壳堤土样5g，100℃干热处理1h放入装有50mL无菌水的三角瓶中，加入一定量的玻璃珠放入摇床上震荡1h，用无菌水梯度稀释（最终稀释10000倍），涂布于高氏一号培养基（培养基组成：可溶性淀粉20g；KNO₃1g；K₂HPO₄0.5g；MgSO₄·7H₂O0.5g；NaCl0.5g；FeSO₄·7H₂O0.01g；琼脂20g；水1000mL；pH7.2～7.4)，28℃恒温培养6天。培养获得的放线菌根据菌落形态和颜色进行分类和编号，并经反复划线进行纯化。分离获得的菌株以冬枣轮纹病病菌、黄瓜枯萎病病菌为指示菌，通过平板对峙培养法进行筛选，最终获得抑菌效果最好的Streptomyces sp.BK。 

链霉菌（Streptomyces sp.）BK CGMCC No.7489菌落特征：在高氏一号培养基平板上培养7天的菌落直径4～6mm，气丝为白色，表面致密、干燥、多皱、不易挑起。