[发明专利]一种青黛酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种青黛酮的制备方法。

背景技术

青黛酮（Qingdainone）为生物碱类物质，暗紫色细针晶，CAS号97457-31-3，分子式C₂₃H₁₃N₃O₂，分子量363.38，来源于爵床科(Acanthaceae) 马兰Baphicacanthus cusia(Nees)Brem.的茎叶。研究表明，青黛酮具有抗肿瘤活性。对小鼠Lewis肺癌及黑色素瘤细胞株B16均有抑制作用。

马兰味辛，性微寒。归肝、肾、胃、大肠经。能清热解毒，散瘀止血，利湿，消食，消积。用于感冒发烧，咳嗽，急性咽炎，扁桃体炎，流行性腮腺炎，传染性肝炎，胃、十二指肠溃疡，小儿疳积，肠炎，痢疾，吐血，崩漏，月经不调；外用治疮疖肿痛，乳腺炎，外伤出血；痢疾或湿热腹泻；咽喉肿痛，痈肿疮疡；血热衄血、便血；湿热黄疸；或水肿，小便不利；饮食积滞，脘腹胀满。

通过文献检索，国内尚未见采用超临界流体萃取法从马兰的茎叶中制备青黛酮的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种青黛酮的制备方法，工艺简单、提取率高，整个过程具有安全、无毒等优点。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种青黛酮的制备方法，其特征在于以下步骤：

a.取马兰的茎叶粉碎，加入超临界萃取釜中，95%乙醇溶液为夹带剂，在萃取压力28-35MPa、温度45-62℃的条件下，通入液态CO₂萃取50-100min，在压力6.5-9MPa，温度30-40℃解析得萃取物；

b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物；

c.上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，收集目标成分，冷藏结晶，得青黛酮。

步骤a中所述CO₂流量为3.5-5ml/g生药/min，夹带剂用量为总萃取溶剂的10-15%。

步骤b中所述中性氧化镁为200-300目，石油醚-丙酮体积比为20-3:3。

步骤c中所述高速逆流色谱的溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水组合，比例为5-7:8-10:3-4:5-7，下相为流动相，上相为固定相。

本发明的积极效果是：

1.采用超临界CO₂萃取，高效无溶剂残留，对环境无污染；

2.采用柱层析纯化，操作简单，处理量大；

3.采用高速逆流色谱分离，分离速度快，样品无损失，溶剂可以循环使用，适合连续制备。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

马兰的茎叶粉碎，取1kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO₂，设置萃取压力28MPa、温度45℃，达到上述参数后，调整液态CO₂流量为4ml/g生药/min，95%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的12%，动态萃取90min，在压力6.5MPa、温度40℃下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮20:3、12:3、3:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按7:9:4:5混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机1000rpm，泵入下相做流动相，待系统平衡后，流速调节为2.5ml/min，同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度97.2%。

实施例2：