[发明专利]一种杉木愈伤组织培养方法有效
申请号: | 201310195125.X | 申请日: | 2013-05-23 |
公开(公告)号: | CN103229722A | 公开(公告)日: | 2013-08-07 |
发明(设计)人: | 黄开勇;陈琴;郝海坤;蓝肖;戴俊;唐庆兰;张照远 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区林业科学研究院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广西南宁汇博专利代理有限公司 45114 | 代理人: | 邹超贤 |
地址: | 530002 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杉木 组织培养 方法 | ||
1.一种杉木愈伤组织培养方法,其特征在于:选取杉木种子作为外植体,培养出实生小苗,诱导实生苗的愈伤组织发生后进行增殖,具体操作步骤如下:
(1)无菌实生苗的获取:筛选出颗粒饱满,无病虫害的杉木种子作为外植体,通过无菌培养获得无菌实生苗;
(2)愈伤组织诱导:剪取苗龄为1~10天无菌实生苗的叶片、茎段或根系,接种于诱导培养基中诱导愈伤组织发生;
(3)愈伤组织增殖:将步骤(2)中诱导形成的愈伤组织转入增殖培养基中进行增殖。
2.根据权利要求1所述的杉木愈伤组织培养方法,其特征在于:所述的无菌实生苗的培养方法是将杉木种子置于三角瓶内,加入浓度为1~5%的洗洁精溶液,采用纱布封住瓶口,置于摇床上振荡漂洗10~15 min后,置于流水下冲洗1~2h,然后用无菌水清洗2~3次,将种子转到超净工作台上用0.15%升汞溶液灭菌9~12min,无菌水清洗8~10次后,将种子接种于1/2MS~MS培养基上进行培养,获取无菌实生苗。
3.根据权利要求1所述的杉木愈伤组织培养方法,其特征在于:所述的诱导培养基主要由:1/2MS~MS + 1.0~2.0 mg/L 2,4-D + 0.5~1.5mg/L KT + 100~150 mg/L维生素C + 0.75%琼脂 + 3.0%蔗糖组成。
4.根据权利要求1所述的杉木愈伤组织培养方法,其特征在于:所述的愈伤组织增殖方法是取出诱导而得的愈伤组织团,切成小块后转入增殖培养基中进行增殖培养。
5.根据权利要求1或4所述的杉木愈伤组织培养方法,其特征在于:所述的增殖培养基主要由:1/2MS~MS + 1.0~2.0mg/LKT + 0.5~1.5mg/LIBA + 100~150 mg/L维生素C + 0.75%琼脂 + 3.0%蔗糖组成。
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