[发明专利]一种杉木初代培养芽诱导方法

权利要求书

1.一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：采用杉木基部萌条为外植体，通过外植体无菌处理后，将外植体接种于优质初代培养芽诱导培养基上，置于适宜的温度、湿度和光照强度条件下进行培养，诱导芽的萌发；其操作步骤为，

（1）外植体选择：选择杉木基部萌发的半木质化的萌条为外植体；    

（2）外植体消毒及接种：将杉木萌条针叶剪去，经过洗洁精清洗，流水冲洗和化学试剂处理消毒后，剪切成茎段接入培养基中；

（3）芽诱导培养：将接种后的外植体置于适宜室内条件下培养。

2.根据权利要求1所述的一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的芽诱导培养基包括改良1/2MS~MS培养基，激动素6-糠氨基嘌呤（KT），维生素C，琼脂和蔗糖；其中改良1/2MS~MS培养基的大量元素中NH₄NO₃含量为550~1100 mg/L；激动素6-糠氨基嘌呤（KT）含量为0.5~2.0 mg/L；维生素C含量为10~15mg/L；琼脂含量为0.8 %和蔗糖含量为3%。

3.根据权利要求1所述的一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的萌条是长为4~10cm的半木质化的粗壮萌条。

4.根据权利要求1所述的一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的消毒及接种是将杉木萌条针叶剪去，置于三角瓶中，加入浓度为1~5 %的洗洁精溶液，采用纱布封住瓶口，置于转速为200 r/min的摇床上清洗10~15 min后置于流水下冲洗1~2 h，然后用无菌水清洗2次，将外植体转到超净工作台上用0.15 %升汞溶液灭菌9 min；再采用无菌水冲洗8~10次后剪成长为1.5~2.5 cm长的茎段接种于芽诱导培养基中，每瓶接种2个茎段。

5.根据权利要求4所述的一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：在所述的升汞溶液每150~200 ml中滴1滴吐温20，搅拌均匀。

6.根据权利要求1所述的一种杉木初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的芽诱导培养是将接种后的外植体置于温度为23±2 ℃，湿度为35~45 %的室内条件下进行暗培养8~10天后转到光照强度为2200~2400 lx 的室内条件下培养。