[发明专利]对柑桔病原菌有抑制作用的植物提取物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种一种对柑桔病原菌有抑制作用的植物提取物及其制备方法。本发明属于植物提取物及其抗菌活性领域。

背景技术

柑桔青霉病和绿霉病分别是由意大利青霉菌(Penicillium italium)和绿霉菌(Penicillium digitaum)引起的植物病害。据统计，柑桔果实在贮运过程中因烂果造成的损失以柑桔青霉病和绿霉病为主，占90%以上。目前，生产上广泛应用的柑桔病害的防治措施是采用化学杀菌剂如噻菌灵、抑霉唑、邻苯基苯酚钠(SOPP)等，这些药剂作为柑橘防腐剂使用已有多年历史。然而，由于人们对化学药物的不合理使用和药物本身固有的缺点，致使化学农药在使用中产生了环境污染、人畜中毒、农药残留等问题，随着人们生活质量的提高和环保意识的增强，公众对限制化学杀菌剂的呼声越来越高。为了寻求有可能代替化学杀菌剂的新方法，人们把目光转向了安全、稳定、无污染、高效的天然药物。

方才君（1989）研究发现，香叶油、香茅油对柑桔青霉菌有明显的抑制作用，次为留兰香油，香莆油的抑菌力最弱。供试精油对柑桔绿霉的抑菌活性仍以香叶油和香茅油最强，留兰香油较前两者低得多，香蕾油则更低。席玙芳等（1993）研究发现，大蒜、洋葱、生姜的汁液对柑桔青、绿霉菌均有抑制和杀灭作用，其中大蒜韵抑菌作用性能最强，洋葱次之，生姜则较差。徐齐云等（2006）研究发现，银杏叶乙醇浸提物、石油醚萃取物、三氯甲烷萃取物和水萃取物4种提取物对柑桔青霉病菌均有一定抑制效果,但只有石油醚萃取物对柑桔青霉病菌抑菌效果好。丘麒等（2008）研究发现，油茶籽、海芋、山菅兰、水茄、上海叶冬青、桃花心木、侧柏、深山含笑等的提取物对柑橘青绿霉菌有一定的抑菌活性。胡军华等（2010）研究发现，川芎、侧柏、苍耳和五加皮的提取物对柑桔青霉菌的抑制作用较强，抑菌率均在97%以上；五加皮和侧柏的提取物对柑桔绿霉菌抑制作用较强。曾荣等（2010）研究发现，11种植物提取液对意大利青霉显现出不同程度的抑制效果,其中以凤仙透骨草、广藿香、青蒿、水菖蒲等植物的提取液抑制作用较为明显。另外，曹婷婷等（2008）研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZK菌株发酵产物捷安肽素对柑桔青绿霉菌的抑制作用，证明捷安肽素在PDA平板上对柑桔绿霉菌比青霉菌对捷安肽素敏感。

上述研究从植物提取物、微生物发酵产物等方面研究了抗柑桔青绿霉菌的活性，也发现了具有一定抗菌活性的提取物，但是提取物的抗菌效果并不理想，并且所用提取材料多是经济或药用物种。能否找到一种既具有良好抗菌活性又更为廉价的材料，进而获取更具有实用价值的抗菌活性物质以及提取方法？

基于以上背景，发明人以通常作为废弃物的核桃青皮为原料，开展了具有抑制柑橘青、绿霉菌提取物的提取方法和抑菌作用的研究。以下为本发明的具体内容。

发明内容

本发明目的是提供一种对柑桔病原菌有抑制作用的植物提取物及其制备方法。

为实现上述目的，本发明包括以下技术方案：

本发明首先提供一种核桃青皮提取物的提取方法，该方法包括：将核桃青皮置于50℃烘箱内烘干至恒重并粉碎，过90目筛，称取核桃青皮粉以无水甲醇为提取溶剂，料液比为1:15，65℃下回流提取3次，每次2h，合并提取液减压浓缩成浸膏状至恒重。然后，用丙酮-水（1:1）溶解完全，依次用等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，经减压浓缩后获得甲醇提取物各萃取相提取物。

本发明还提供另一种核桃青皮提取物的提取方法，该方法包括：核桃青皮置于50℃烘箱内烘干至恒重并粉碎，过90目筛，称取核桃青皮粉以石油醚为提取溶剂，料液比为1:15，65℃下回流提取3次，每次2h，合并提取液减压浓缩成浸膏状至恒重。

其中，上述提取方法中提到的料液比1:15为质量/体积比（w/v)，即1克材料用15毫升溶剂；上述方法中提到的丙酮-水（1：1）为体积/体积比（v/v)，即1毫升丙酮与1毫升水混合。

其中，上述提取方法中所得石油醚提取物即为具有抗菌活性作用的提取物。

上述第二种方法直接由石油醚抽提浓缩，省去了甲醇抽提、溶剂萃取等步骤，简单易行。

其次，本发明还提供一种核桃青皮提取物，该提取物为按照上述两种提取方法获得的石油醚提取物分别经减压浓缩获得的石油醚膏状物。

另外，本发明还提供上述核桃青皮提取物在作为抗菌剂中的用途。