[发明专利]一种堡树酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种从特氏堡树的根皮中分离制备堡树酮的方法。

背景技术

堡树酮（Castelanone）是一种苦木素类活性物质，来源于苦木科(Simaroubaceae) 特氏堡树Castela tweedii的根皮，mp237-239℃，分子式为C₂₅H₃₄O₉，分子量为478.54，结构式为：

。

堡树酮对KB细胞有细胞毒活性；对鲁斯氏肉瘤病毒诱发的细胞转移有抑制作用，在浓度为0.15～1μg/mL时对病灶的抑制率为76%-99%，而对正常细胞的生长没有影响。

目前，国内学者对堡树酮的研究还处于起步阶段，尚未见堡树酮工业化生产工艺的披露。

发明内容

本发明的目的是提供一种堡树酮的制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种堡树酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取特氏堡树的根皮，经粉碎处理，置于闪式提取器中，加5-12倍80-85%乙醇溶液，进行闪式提取，过滤得到提取液；

（2）提取液通过截留分子量为2000-3000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为0.5-2.1MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；

（3）将正己烷、甲醇、水在分液漏斗中充分混合，静置分层后，取下相做固定相，充满逆流色谱仪柱，开转主机，泵入上相做流动相，平衡后，由进样阀注进样，根据检测器图谱，收集堡树酮组分；

（4）将堡树酮组分进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得堡树酮。

所述步骤（1）中闪式提取电压为140-150V，提取时间为60s-90s。

所述步骤（3）中正己烷、甲醇、水混合比例为4-6:3-8:3-5。

所述步骤（3）中真空浓缩温度为65-75℃。

本方法积极效果是：

（1）本方法采用闪式提取法，快速高效、低耗能、环保；

（2）本方法采用膜分离技术，能有效去除多种杂质，且不会破坏有效成分的生物活性；

（3）本方法采用高速逆流色谱，收率高、制备量大、制备周期短，解决了柱层析效率低而且污染严重的技术缺陷；

（4）本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取特氏堡树的根皮，经粉碎处理，称取1kg，加5倍80%乙醇溶液，提取电压为140V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为3000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为1.2MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；取正己烷、甲醇、水，按5:6:5比例在分液漏斗中充分混合，静置分层后，取下相做固定相，充满逆流色谱仪柱，开转主机，转速调整为900rpm，泵入上相做流动相，平衡后，流速调整为3ml/min，由进样阀注进样，根据检测器图谱，收集堡树酮组分，68℃温度下进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，过滤、洗涤干燥即得堡树酮，含量96.0%。

实施例2：

取特氏堡树的根皮，经粉碎处理，称取1kg，加12倍80%乙醇溶液，提取电压为140V，提取时间为80s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为2000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为1.8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；取正己烷、甲醇、水，按5:3:3比例在分液漏斗中充分混合，静置分层后，取下相做固定相，充满逆流色谱仪柱，开转主机，转速调整为1050rpm，泵入上相做流动相，平衡后，流速调整为2.5ml/min，由进样阀注进样，根据检测器图谱，收集堡树酮组分，75℃温度下进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得堡树酮，含量96.4%。

实施例3：