[发明专利]一种原位膀胱癌动物模型以及鉴定方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物模型领域，具体地说，是一种原位膀胱癌动物模型以及鉴定方法。

背景技术

在我国，膀胱肿瘤是泌尿系统高发的肿瘤，建立膀胱癌动物模型对于研究人类膀胱癌有重要意义。国内外已有研究和报道证实N-甲基亚硝基脲(N-methyl nitrosourea，MNU)可作为化学致癌剂用于建立原位膀胱癌动物模型。但模型建立后只能通过处死大鼠进行病理学诊断以判断模型是否成功建立，从而无法对建模后的动物进行下一步的体内实验。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种原位膀胱癌动物模型。

本发明的再一的目的是，提供一种原位膀胱癌动物模型的建立方法。

本发明的另一的目的是，提供一种原位膀胱癌动物模型的鉴定方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种原位膀胱癌动物模型，所述的动物模型的建立方法为：SD大鼠膀胱内灌注20mg/mL致癌剂MNU溶液诱发膀胱癌，每次灌注0.1mL，每周灌注1次，共6次。

所述的动物模型的建立方法包括以下步骤：

a) SD大鼠用2% 50mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉，麻醉起效后仰卧固定；

b) 75%酒精消毒会阴部；

c) 取大鼠导尿管，石蜡油润滑后，从尿道外口插入，经尿道置入膀胱，进入膀胱后可见尿液从导尿管流出；

d) 抽尽膀胱内尿液，注入20mg/mL 的MNU溶液0.1mL；

e) 拔除导尿管，大鼠平卧，等待麻醉清醒。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种原位膀胱癌动物模型的建立方法，所述的动物模型的建立方法为：SD大鼠膀胱内灌注20mg/mL致癌剂MNU溶液诱发膀胱癌，每次灌注0.1mL，每周灌注1次，共6次。

所述的动物模型的建立方法包括以下步骤：

a) SD大鼠用2% 50mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉，麻醉起效后仰卧固定；

b) 75%酒精消毒会阴部；

c) 取大鼠导尿管，石蜡油润滑后，从尿道外口插入，经尿道置入膀胱，进入膀胱后可见尿液从导尿管流出；

d) 抽尽膀胱内尿液，注入20mg/mL 的MNU溶液0.1mL；

e) 拔除导尿管，大鼠平卧，等待麻醉清醒。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：所述的原位膀胱癌动物模型的鉴定方法，所述的鉴定方法是对大鼠进行膀胱CT扫描。

包括以下步骤：

a) 膀胱灌注后第7周，对大鼠进行膀胱CT扫描，膀胱CT扫描方法如下：

b) SD大鼠用2% 50mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉，麻醉起效后仰卧固定；

c) 经尿道膀胱内置入导尿管，注入1-2mL生理盐水，以充盈膀胱，注入生理盐水后，用丝线轻轻结扎尿道外口，以防膀胱内液体溢出；

d) GE light speed 16层螺旋CT对大鼠下腹部进行扫描，扫描层厚1.25mm；

e) 扫描结束后，抽出膀胱内液体。

本发明优点在于：

1、为原位膀胱癌动物模型提供了一种新的构建方法；

2、提供了一种新的通过活体检测膀胱癌建模的方法，可剔除不利于进一步体内实验的肿瘤模型，同时可利用CT扫描来评估膀胱癌动物模型治疗前后的效果；

3、通过CT 扫描诊断大鼠原位膀胱癌的方法更加灵敏、准确率更高、更直接方便，为进一步动物模型的实验研究提供便利。

附图说明

图1. 经尿道膀胱内置管灌注。

A：雌性SD大鼠会阴部矢状面示意图。B：经尿道膀胱内置管示意图：大鼠平卧固定，向头侧推移下腹部皮肤（红色箭头）以牵拉尿道外口向上前倾，充分暴露尿道外口；蘸有石蜡油的导尿管紧贴尿道外口后壁缓缓插入（蓝色箭头），导尿管与水平成角α<45度；当遇到阻力时停止插入，松开推移的皮肤，向尾侧旋转导尿管方向，使导尿管方向接近水平（黑色箭头），再缓缓插入，进入膀胱时有突破感，插入导尿深度2.5-3cm。若旋转导尿管方向后仍有阻力，应立即拔出导尿管改变α角度重复上述步骤。C：导尿管插入尿道外口。D：导尿管进入膀胱，抽出淡黄色尿液。

图2. 膀胱灌注7周后大体观。