[发明专利]治疗奶牛乳房炎的中药微囊剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于兽药领域，尤其是一种治疗奶牛乳房炎的中药微囊剂及其制备方法。

背景技术

甘草化学成分包括三萜类化合物，包括甘草根和甘草甜素；黄酮类化合物，包括黄酮类、二氢黄酮类、黄铜醇类、查尔酮类和双黄酮蕾，其中以二氢黄酮类和查尔酮类含量较高。

甘草查尔酮是甘草的另一种主要有效成分，具有良好的抗炎，抗菌作用。有研究表明，甘草查尔酮能明显降低显著降低促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌，说明该药物从一定程度上能够抑制RAW264.7巨噬细胞分泌促炎因子，对LPS引起的炎症有一定的抑制作用。此外，应用肉汤微量稀释法测定甘草查尔酮对金黄色葡萄球菌的抗菌活性，并通过溶血试验、Westernblot分析和荧光定量PCR试验考察亚抑菌浓度的甘草查尔酮对金葡菌-溶血素表达的影响。结果显示，甘草查尔酮对7株金葡菌的最低抑菌质量浓度为28mg/L亚抑菌浓度的甘草查尔酮能显著降低金葡菌-溶血素的表达且呈现剂量依赖性。

长期以来，工业化生产只对甘草中的甘草苷和甘草酸作为主要有效成分进行提取，分离工艺比较成熟。而对甘草查尔酮的提取及其制剂的研究的较少。

二○一○年版《中华人民共和国兽药典》二部收载有甘草的流浸膏和浸膏两种提取物，前者以甘草酸，后者以甘草酸和甘草苷作为有效成分进行含量测定。

甘草浸膏提取工艺为水提后沉淀，取上清液浓缩，烘干得甘草浸膏粉。浸膏粉以甘草苷和甘草酸为主要有效成分进行含量测定。此工艺提取物后的药渣一般都会当成废物，舍弃不用。为了更加合理地利用有限的甘草资源，使甘草最大限度地发挥其药用价值，本课题组从甘草废渣中提取甘草查尔酮并将其制备成微囊剂。

课题组首先采用高效液相色谱法对甘草药材中的甘草查尔酮的进行含量测定，测定甘草查尔酮的色谱条件为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(70∶30)为流动相，检测波长为276nm，柱温30℃，流速1.0mL·min-1。测得甘草查尔酮的含量为0.5％。之后按同样的提取方法测得甘草药渣中甘草查尔酮的含量为0.47％，由此可见，提取甘草浸膏后的甘草残渣中甘草查尔酮的含量损失不严重，可作为提取甘草查尔酮的药材。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗奶牛乳房炎的中药微囊剂，该中药微囊剂起效速度快、无毒副作用、无药物残留，使用方便，节约生产成本，生物利用度高。

本发明的另一个目的在于提供一种治疗奶牛乳房炎的中药微囊剂及其制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种治疗奶牛乳房炎的中药微囊剂及其制备方法，其制备方法的步骤如下：

(1)从甘草废渣中提取甘草查尔酮：

a、将甘草废渣加入1.5-10倍有机溶剂浸泡0.5-3h后加入浓度为45％-75％等重量的乙醇溶液，微波处理3次，即得到微波辅助提取液，备用；

b、向上述步骤(a)所得微波辅助提取液中加入3-15倍浓度为45％-75％乙醇溶液，静置15-60min后用超声仪提取两次，15～40min/次，即得到超声仪提取液，备用；

c、将上述步骤(b)所得超声仪提取液减压浓缩，用2-10倍有机溶剂连续萃取后再进行减压浓缩，即得到浓缩物，备用；

d、将上述步骤(c)所得浓缩物进行大孔树脂柱洗脱分离，用高效液相色谱仪或薄层层析法检查流出液，根据检测数据收集含甘草查尔酮的流出液，备用；

e、将上述步骤(d)所收集的流出液用有机溶剂进行结晶，即得到高纯度甘草查尔酮。

(2)甘草查尔酮微囊剂的制备：

a、将上述步骤(1)所得高纯度甘草查尔酮在研钵中研细后加入明胶溶液，水浴上加热，继续研磨成混悬液，备用；

b、取液体石蜡水浴加热到同一温度，加入吐温-80，将上述步骤(a)所得混悬液倒入，中速搅拌5-10min，看到圆球状微囊形成后立即放入冰水浴中冷却，且不断搅拌10-15min，再加入5℃异丙醇脱水，抽滤，再将微囊放到37％甲醛中固化30-60min，抽滤，用水洗至无甲醛味后置恒温烘箱中45℃左右干燥1-2小时即得治疗奶牛乳房炎的中药微囊剂。

而且，所述的甘草废渣为甘草浸膏或流浸膏提取物后的药渣。

而且，所述的有机溶剂为氯仿、甲醇、丙酮、乙醇、乙醚、三氯乙烷、异丙醇等其中的一种或两种以上混合物。

而且，所述的超声仪的频率为20Hz～50Hz，温度控制为20℃。

而且，所述的微波处理采用的参数为微波功率340～510W，压力0.10MPa，恒压时间1～5min。