[发明专利]一种富含胶原三肽的胶原蛋白粉及其制备方法

权利要求书

1.一种的富含胶原三肽的胶原蛋白粉，其特征在于，所述的蛋白粉的制备方法如下：

1）原料预处理：

将鱼皮清洗，沥干鱼皮表面的水，然后将鱼皮粉碎；

2）酶解：

首先在粉碎的鱼皮中加入鱼皮重量20%的水，混匀后升温至55℃，调节pH7.0，然后加入鱼皮重量0.1-0.2%的酶A， 55℃、pH7.0条件下酶解2-3小时；

酶A酶解结束后，降温至50℃，然后加入鱼皮重量0.05-0.1%的酶B， 在pH7.0继续水解1-2小时；

然后温度降为45℃，调节pH至7.5，加入鱼皮重量0.05-0.1%的酶C继续水解2小时，全部水解结束后升温至95℃保持10分钟使酶灭活；

3）固液分离：

采用离心机在离心力10000g条件下对鱼皮酶解液离心20-30分钟，收集酶解上清液；

4）过滤处理：

将酶解上清液先采用0.2μm孔径的膜过滤，滤过液再采用截留分子量5000Da的超滤膜进行超滤，收集滤过液；

5）脱腥脱色：

向超滤的滤过液中加入滤液体积2-10%的活性炭粉末，在50-70℃温度下搅拌脱腥脱色30-60分钟，然后过滤除去活性炭粉末；

6）浓缩及干燥：

脱腥脱色的酶解液在55℃条件下采用减压浓缩至固形物含量为35%或以上，然后采用离心式喷雾干燥，得到富含胶原三肽的胶原蛋白粉。

2.如权利要求1所述的胶原蛋白粉，其特征在于所述的酶A为中性蛋白酶。

3.如权利要求1所述的胶原蛋白粉，其特征在于所述的酶B为肽酶和风味酶的混合酶，其中肽酶和风味酶的质量比为1：4。

4.如权利要求1所述的胶原蛋白粉，其特征在于所述的酶C为胶原蛋白酶，是从保藏编号为CGMCC NO.7567的Bacillus subtilis菌中制备的；其制备方法如下：首先将Bacillus subtilis菌用LB培养基扩大培养制得种子液，然后将种子液接种到产酶培养基中，于37℃，200rpm培养48小时，培养结束后，在4℃条件下、10000rpm离心10min，收集发酵上清液；向发酵上清液中加入硫酸铵沉淀蛋白，然后在4℃离心收集沉淀，沉淀用清水溶解后超滤脱盐；向脱盐后的酶溶液加入麦芽糊精，最后冷冻干燥或喷雾干燥得到胶原蛋白酶。

5.如权利要求4所述的胶原蛋白粉，其特征在于所述的产酶培养基成分如下：葡萄糖 20g/L，酵母提取物1.5 g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钙 0.05 g/L，氯化镁0.165 g/L，磷酸氢二钾0.25 g/L，磷酸二氢钠 0.5 g/L，pH 7.5。

6.如权利要求1所述的胶原蛋白粉，其特征在于所述的鱼皮为深海鳕鱼鱼皮或罗非鱼鱼皮。