[发明专利]一种提取纯化丁酰基梧桐素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物领域，具体而言，本发明涉及一种提取纯化丁酰基梧桐素的方法。

背景技术

丁酰基梧桐素（Butyrylmallotolerin），黄色针晶，mp197-198℃，主要存在于大戟科(Euphorbiaceae) 野梧桐 Mallotus japonicus Muell.Arg.果皮中，分子式：C₂₂H₂₄O₉，分子量：432.43，结构式为：

。

现代药理研究表明，丁酰基梧桐素具有细胞毒作用。对HeLa细胞的ID50为342ng/mL，对KB细胞的ED50为0.95μg/mL，对L5178Y细胞株的ED50为0.82μg/mL。对Hep-2、PC-13、B16、L5178Y、P388细胞的IC50(μg/mL)依次为0.91、63、2.38、27、1.22。丁酰基梧桐素还具有抗病毒作用。抑制单疱病毒HSV-1的复制，其ED50为196ng/mL。

经文献检索，尚无适用于高纯度丁酰基梧桐素的提取纯化方法报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化丁酰基梧桐素的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种提取纯化丁酰基梧桐素的方法，其特征在于按如下工艺步骤进行：

（1）以野梧桐的果皮为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取野梧桐的果皮中的油脂类物质；

（2）残渣加8-10倍（V/W）75-90%乙醇溶液进行超声循环提取2-3次，每次1-2h，合并提取液；

（3）提取液浓缩后上聚酰胺树脂柱，先用水和30%乙醇溶液洗脱，再用65%乙醇溶液洗脱，收集65%乙醇洗脱液；

（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:3-5，以氯仿-甲醇混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；

（5）分出结晶，丙酮-正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得丁酰基梧桐素。

所述步骤（1）中超临界二氧化碳萃取温度为30-45℃，压力为22-30MPa，萃取时间为0.5-1h。

所述步骤（4）中氯仿-甲醇混合溶液体积比为1:1-5。

所述步骤（5）中丙酮-正己烷混合溶剂体积比为2.5:1。

综上所述，本发明存在以下优点：

（1）采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效。

（2）采用超声循环提取的方法，提取效率高。

（3）采用聚酰胺树脂和硅胶短粗柱层析后进行结晶，从而获得含量95%以上的丁酰基梧桐素，成本低，分离效果好。

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式：

实施例1：

取野梧桐的果皮粗粉500g，采用超临界二氧化碳技术萃取野梧桐的果皮中的油脂类物质，萃取温度为30℃，压力为25MPa，萃取时间为1h，残渣加9倍（V/W）90%乙醇溶液进行超声循环提取2次，每次1h，合并提取液，浓缩后上聚酰胺树脂柱，先用水和30%乙醇溶液洗脱，再用65%乙醇溶液洗脱，收集65%乙醇洗脱液，浓缩，与100-200目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:5，以氯仿-甲醇混合溶液为洗脱剂，依次按1:1、1:3、1:5体积比进行洗脱，收集含丁酰基梧桐素的洗脱液，回收试剂，将所得丁酰基梧桐素浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮-正己烷（2.5:1）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得丁酰基梧桐素1.2g，纯度为97.8%。

实施例2：