[发明专利]一株具有荧蒽降解能力的耐盐碱产吲哚乙酸菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物，说涉及一株具有荧蒽降解能力的耐盐碱产吲哚乙酸菌及其应用。

背景技术

在土壤中许多微生物能够溶解难溶态磷，促进植物对磷的吸收，增加作物产量和改善作物品质，将解磷微生物作为生物肥料，不但可以提高土壤中磷的利用效率，节肥增产，而且可改善土壤结构，提高土壤有机质含量。植物促生菌(Plant Growth Promoting Bacteria，简称PGPB)被界定为在一定条件下有利于植物生长的自由生活在土壤、根际、根表、叶际的细菌。这些细菌能够固氮、溶磷、溶铁，并产生植物激素，如生长素、赤霉素、细胞分裂素和乙烯。此外，它们还能提高植物的抗逆性，包括干旱、高盐碱、重金属和有机污染物毒害。但现在大部分植物促生菌还未被驯化成能有效提高植物各种抗逆性的菌株，因此从植物根际土中分离得到能有效提高植物各种抗逆性的植物促生菌成为热点。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种蜡状芽孢杆菌，能高效产吲哚乙酸并能在高盐碱条件生长且能利用难溶性磷酸盐为磷源进行生长，并对多环芳烃荧蒽具有一定的降解效果。

本发明的目的可通过如下技术方案实现；

本发明的一种蜡状芽孢杆菌（Bacillus Cereus ZZ13），于2013年3月15日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，分类名为蜡状芽孢杆菌（Bacillus Cereus），保藏号CGMCC No.7322。

所述蜡状芽孢杆菌菌落较小为淡黄色、隆起，边缘整齐，表面光滑湿润，不透明，不规则杆状排列，产芽孢。

所述蜡状芽孢杆菌的生理生化特性是：革兰氏阳性，严格好氧，化能异养，接触酶阳性，M.R和VP试验阴性，淀粉水解阳性，明胶水解阳性，硝酸盐还原阳性，柠檬酸盐利用阴性。

本发明所述的蜡状芽孢杆菌培养时使用的主要氮源包括但不限于蛋白胨、酵母粉、硝酸钾、硝酸铵、硫酸铵、谷氨酸；使用的主要碳源包括但不限于蔗糖、木糖、甘露醇、麦芽糖、乳糖、果糖、葡萄糖；使用的无机组分包括但不限于氯化钾、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸三钙、二水氯化钙、七水合硫酸镁、七水合硫酸亚铁。本发明的蜡状芽孢杆菌发酵可在20～35℃，pH6～10的环境下进行。

本发明所述的蜡状芽孢杆菌分泌吲哚乙酸（IAA）的能力强，在30℃、180r/min摇床培养条件下24h其转化IAA能力达46.67μg.mL^‐1。吲哚乙酸是植物激素的一种，能够促进根的发育。产吲哚乙酸的菌种，往往附着在植物根系或叶表面，利用植物代谢产生分泌物的同时产生IAA和少量GA₃等植物激素来影响植物的生理过程和形态变化。表现为直接促进根的伸长，从而增大了与土壤中营养物质的接触的机会；可提高植物体内源IAA的含量；诱导植物防卫基因的表达，提高植物体抗病，抗旱等抗逆性。作为本发明的优化方案，所述蜡状芽孢杆菌的发酵在温度为28℃、pH6～10下进行，该环境下产IAA量最高。

作为本发明的进一步优化，所述蜡状芽孢杆菌采用的碳源为甘露醇，采用的氮源为酵母粉或蛋白胨或两者的组合。利用上述碳源和氮源制得的培养基，培育出的蜡状芽孢杆菌产IAA的量最高。

本发明所述的蜡状芽孢杆菌可以在高盐碱度条件下进行生长并产IAA。在实验室摇瓶条件下，所述蜡状芽孢杆菌可以在pH为10.5的条件下生长且产IAA，并可以在LB培养基含盐度为7%的条件下生长，在含盐度为4%时可产IAA。

本发明所述的蜡样芽孢杆菌以难溶性磷酸盐为磷源进行生长，并将其转化为可溶性磷酸盐。在实验室摇瓶条件下，所述蜡状芽孢杆菌对磷酸三钙的转化量达148.09mg.L^‐1。相对于空白对照的结果，所述蜡状芽孢杆菌对磷酸三钙的转化量比空白对照高出110.66mg.L^‐1。

本发明所述的蜡样芽孢杆菌多环芳烃荧蒽具有一定的降解效果。在实验室摇瓶条件下，所述蜡状芽孢杆菌在荧蒽初始浓度为50mg.L^‐1的无机盐培养基条件下培养7d后降解率为18.89%，有一定的降解效果。

有益效果：本发明的一种蜡状芽孢杆菌能能高产吲哚乙酸并能耐盐碱生长且能利用难溶性磷酸盐为磷源进行生长，并对多环芳烃荧蒽具有一定的降解效果，可用于制备生物肥料。

附图说明

图1是本发明菌株ZZ13的菌落图

图2表示ZZ13菌株对难溶性磷的利用情况

图3表示不同装液量对菌株ZZ13产IAA的影响