[发明专利]一种含有生物碱类活性成分的海参提取物及其提取方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及含有来源于动物体生物碱类活性成分的提取物，尤其涉及含有与肌苷、腺苷、鸟苷、尿苷和脱氧胸苷为立体异构体的生物活性物质的海参提取物及其提取方法和应用。同时，也涉及来源于动物体的有效成分为主的医药配制品。

背景技术

海参纲(Holothuroidea或Holothurioidea)是棘皮动物门（Echinodermata）中经济意义最大的一纲。其中楯手目分3个科(辛那参科Synallatidae、海参科Holothuriidae、刺参科Stichopodidae)，刺参科又分3个属（仿刺参属Apostichopus、刺参属Stichopus、梅花参属Thelenota）。仿刺参属(刺参)Apostichopus japonicus在辽宁大连、旅顺、海洋岛及山东沿海地区有广泛分布。我国自古以来将其作为佐膳珍品。中医认为：“其性温补，足敌人参，故曰海参”。海参味甘性温，有补肾经。益精髓、消痰涎、壮阳疗萎之功，是滋补、健身、治病、防老之佳品。现代药理研究表明海参有抗凝血、抗血栓、降血脂、降低血粘度、抗肿瘤、免疫调节、抗菌及促细胞生长等多种药理活性。

从海参的化学和活性的研究来看，有效成分研究多集中在粘多糖和蛋白多糖、海参皂甙（海参素）及海参多肽。其中海参粘多糖有抗凝、降血脂等作用^[1,2]。海参皂甙有造血、抑瘤、抗真菌等活性^[3,4,5]。海参多肽则有抗氧化等^[6]。偶有研究报道了海参次生代谢物质的成分，提到了分离到尿嘧啶、胸腺嘧啶、胸腺嘧啶脱氧核苷、腺嘌呤核苷等物质，但并没有与标准品在结构及活性方面比较研究的相关报道^[7]。在诸多海参的化学成分中哪些成分可以作为海参的主要有效成分，这一问题目前仍在探讨中。

海参产地和品种众多，如何对海参质量进行评价？另外，以海参为原料的药品及食品的质量如何评价？显然，质量的评价应该以海参的活性成分的化学性质相关，以确保海参的质量和以海参为原料的药品及食品的质量及安全。同时，海参制剂的制备方法各不相同。如果不清楚海参的主要有效成分，不知道这些有效成分的化学性质，在提取过程中将带有极大的盲目性，有可能造成有效成分的损失及资源的浪费。目前，由于海参的主要活性成分及药理活性仍在探讨中，海参质量尚没有相关的评价标准。在本发明中，从海参活性部分的总提取物中，分离到5种单体化合物H2a、H2b、H2c、H2d、H2e。经二维核磁共振谱分析，它们分别是肌苷、腺苷、鸟苷、尿苷和脱氧胸苷的立体异构体。经与标准品比较，提取物有广泛的药理活性，而标准品则无活性。这些提取物的化学性质及特征，可能成为海参质量的评价标准之一。

目前，在食品或医药制剂领域，已有很多海参产品，但在产品的制备中，海参有效成分的提取工艺及相关制剂多围绕已有的研究成果和一些概念去研发。其中，海参的制剂以海参的全成分胶囊为主的较多^[8,9]。海参多肽是以酶解的方法使蛋白水解成小肽，近年有关制剂的胶囊产品较多^[10,11]。但未见有关活性海参多肽的单体分离，及氨基酸序列分析的报道。海参多糖是研究最多的活性成分之一,海参的多糖提取物作为制剂的专利也最多^{[12,13,14,15,16]}。其他还有用海参皂甙提取工艺作为制剂的原料^[17,18]。因尚不清楚海参的主要活性成分以及有效成分药理作用的有效剂量范围。因此，目前海参制剂的各种提取工艺及其制剂均存在问题，有可能造成浪费的资源，而且各种制剂的有效剂量也无法定量。这些问题给海参在药品及食品的应用中带来一定的盲目性。本发明在海参活性成分清楚的前提下，对其在提取物中的含量进行了定量，对有效剂量范围进行实验验证。

参考文献

[1]蒋鑫,徐静,苏秀榕,等.海参多糖对急性不完全性脑缺血的保护及抗凝作用的研究.中国应用生理学杂志,2012,28(2)：170-173.

[2]武晓琳,王玉明,常耀光,等.不同性质海洋硫酸多糖的制备及其改善大鼠脂肪肝作用的比较研究.中国海洋药物杂志2011;30(1):25-28.

[3]李冰,王静凤,安淼,等.革皮氏海参皂苷对环磷酰胺所致骨髓损伤模型小鼠造血作用的研究.营养学报2011;33(2):173-175.

[4]樊廷俊,袁文鹏,丛日山,等.仿刺参水溶性海参皂苷的分离纯化及其抑瘤活性研究.药学学报2009,44(1):25-31.