[发明专利]一种圆盘式漆酶传感器电极及其制备方法

权利要求书

1.一种圆盘式漆酶传感器电极，其特征在于，该电极是由溅射金薄膜的不锈钢圆盘电极和负载漆酶的壳聚糖-金属纳米粒子敏感膜组成，敏感膜的厚度为5-10μm。

2.根据权利要求1所述的不锈钢圆盘电极，其特征在于，所述不锈钢组成是316L不锈钢，圆盘直径为1-4mm。

3.根据权利要求1所述的负载漆酶的壳聚糖-金属纳米粒子敏感膜，其特征在于，所述壳聚糖的分子量为5-10万，所述金属纳米粒子为金或银纳米粒子。

4.根据权利要求1或3所述的负载漆酶的壳聚糖-金属纳米粒子敏感膜，其特征在于，所述敏感膜中漆酶的含量为0.01-0.06mg。

5.一种权利要求1所述的圆盘式漆酶传感器电极的制备方法，其特征在于，包括以下过程：

1)原位还原法制备壳聚糖-金属纳米粒子溶胶

取0.2-1g分子量为5-10万的壳聚糖溶于50-100mL质量浓度为0.5-2％的醋酸溶液中，超声振荡10-60min。然后将5-20ml质量浓度为0.1-5mg/ml的AgNO₃或HAuCl_4·4H₂O加入到上述壳聚糖溶液中，磁力搅拌20-60min后，逐滴加入5-15ml质量浓度为0.5-2％的柠檬酸钠溶液，用0.1mol/L NaOH调节溶液pH值为6-7，室温搅拌反应4-20h，得到壳聚糖-金属纳米粒子溶胶。

2)壳聚糖-金属纳米粒子固定化漆酶

移取5-50μL上述壳聚糖-金属纳米粒子溶胶加入到2-10ml质量浓度为1-5mg/ml的漆酶溶液中，在1-4℃的冰浴中磁力搅拌24-72h，使漆酶充分固定在壳聚糖-金属纳米粒子胶体中，得到负载漆酶的壳聚糖-金属纳米粒子溶胶。

3)圆盘式漆酶传感器电极的制备

将直径为1-4mm溅射有金薄膜的316L不锈钢圆盘电极在麂皮上打磨抛光，经二次蒸馏水反复冲洗、超声、干燥后，置于pH为5.0的PBS溶液中经电化学循环伏安扫描活化20圈。

取5-10ml步骤(2)中负载漆酶的壳聚糖-金属纳米粒子溶胶，然后加入对苯醌，溶液中对苯醌质量浓度为5-20mM。将预处理的不锈钢圆盘电极置于上述溶液中，采用三电极工作体系，以铂电极作为对电极，饱和甘汞电极(SCE)作为参比电极，预处理的不锈钢圆盘电极作为工作电极，在-0.05--0.3V的电位下电化学还原10-50min，通过苯醌电还原诱导负载漆酶的壳聚糖-金属纳米粒子沉积在电极表面，将电极取出、冲洗、空气中干燥后，得到圆盘式漆酶传感器电极。

6.根据权利要求1所述的圆盘式漆酶传感器电极，其特征在于，该电极对酚类物质具有很好的电催化氧化活性，构建的圆盘式漆酶传感器可用于环境中不同酚类物质的检测，具有高的响应灵敏度，宽的线性范围和低的检测限。